研究目的
本研究旨在评估低强度激光治疗(LLLT)联合间苯三酚(PHL)对体外抑制纤维化的可行效果。
研究成果
PHL辅助的低强度激光治疗(LLLT)可能因其叠加效应成为抑制纤维化的有效疗法。这种联合治疗有望成为纤维化的替代治疗方案。
研究不足
当前研究存在一定局限性:一是未明确联合治疗中起效的治疗机制底层细胞信号因子;二是光子-细胞相互作用产生的低强度激光疗法(LLLT)热效应尚未得到验证。虽然635纳米波长在多种波段中可能对LLLT颇具疗效,但<700纳米波长的强血液吸收特性会阻碍635纳米LLLT在活体环境中的效能。另一局限表现为创面愈合百分比的降低——联合疗法应在促进创面愈合的同时尽量减少纤维化标志物的过表达。此外,本研究仅采用TGF-β作为单一生物评估因子也存在局限。
1:实验设计与方法选择:
培养NIH/3T3小鼠胚胎成纤维细胞,采用转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导成纤维细胞转分化。TGF-β1处理后分别或联合使用低强度激光治疗(LLLT)和脉冲高频光(PHL)抑制纤维化。
2:样本选择与数据来源:
NIH/3T3小鼠胚胎成纤维细胞购自韩国细胞系库。
3:实验设备与材料清单:
可见光激光系统(SD-635-HS-1W;CNI激光)、前端光分配器(Medlight)、功率探测器(PD-300-3W;Ophir)、功率计(Nova Ⅱ;Ophir)、微孔板分光光度计(Multiskan Go;赛默飞世尔科技)、共聚焦激光扫描显微镜(LSM 700;蔡司)。
4:实验流程与操作步骤:
通过MTT法和BrdU法评估细胞活力与增殖能力,采用共聚焦免疫荧光及蛋白质印迹法检测纤维化标志物表达水平。
5:数据分析方法:
使用SPSS 22软件进行统计分析,计算至少三次独立实验的平均值±标准差,非参数统计采用Mann-Whitney U检验。
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power detector
PD‐300‐3W
Ophir
Used to measure the laser power.
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power meter
Nova Ⅱ
Ophir
Used to measure the laser power.
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microplate spectrophotometer
Multiskan Go
Thermo Fisher Scientific
Used to measure the absorbance spectra.
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confocal laser scanning microscope
LSM 700
ZEISS
Used to capture confocal immunofluorescence images.
ZEISS LSM 990 Spectral Multiplex
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visible laser system
SD‐635‐HS‐1W
CNI laser
Used for low‐level laser therapy (LLLT) with a 635 nm wavelength in continuous‐wave mode.
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frontal light distributor
Medlight
Used to irradiate the incident light in a uniform distribution.
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