研究目的
利用FUCCI技术研究一年生鳉鱼滞育进入和退出过程中的细胞周期动态。
研究成果
我们的研究揭示了滞育期间细胞动态具有惊人的协调性，并为这一非凡发育静止状态的进一步发育分析提供了参考框架。
研究不足
这些实验需要长时间占用设备，因为每次延时拍摄从8小时持续到4天不等，从而限制了每个阶段可进行的重复实验次数。
1：实验设计与方法选择：
在非洲青鳉（Nothobranchius furzeri）中建立了稳定转基因品系，表达细胞周期G1期和S/G2期双荧光报告基因（FUCCI）。利用该工具观察鳉鱼发育过程中的细胞周期动态。
2：样本选择与数据来源：
使用转基因品系的胚胎来表征不同发育阶段FUCCI报告基因的表达模式。
3：实验设备与材料清单：
用于共聚焦成像的Leica TCS SP5 X倒置显微镜、用于明场成像的Leica M80体视显微镜、用于流式细胞分析的BD LSRFortessa分析仪。
4：实验流程与操作步骤：
在不同发育阶段对胚胎进行数小时至数天的成像。使用IMARIS软件处理每个时间点的图像堆栈，进行颗粒追踪和计数。
5：数据分析方法：
通过分析不同类型细胞的DNA含量明确显示，“暗色”和红色荧光细胞对应G0/G1期，绿色荧光细胞对应S期，双标记细胞DNA含量高于绿色荧光细胞，表明其处于G2期。
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