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基于石墨烯量子点和金纳米颗粒的荧光猝灭大肠杆菌O157:H7基因检测方法

DOI：10.1007/s00604-019-3913-8 期刊：Microchimica Acta 出版年份：2019 更新时间：2025-09-11 14:15:04
摘要： 本文描述了一种高灵敏度检测大肠杆菌O157:H7的荧光分析法。将报告寡核苷酸固定在石墨烯量子点(GQDs)上，淬灭寡核苷酸固定在金纳米颗粒(AuNPs)上。目标DNA与GQDs上的报告寡核苷酸及AuNPs上的淬灭寡核苷酸共同杂交，导致荧光淬灭（激发/发射峰值为400 nm/530 nm）。当引入目标物时，100 nM浓度下20 bp的目标寡核苷酸可使荧光淬灭达95%。该方法对大肠杆菌O157:H7的fliC基因响应值在0.1 nM至150 nM浓度范围内随浓度的对数增加而升高。检测限为1.1±0.6 nM（n=3）。通过评估不同寡核苷酸序列及从掺有大肠杆菌O157:H7的食品样本基因组DNA中扩增的PCR产物(fliC基因)，证实了该检测方法的特异性和选择性。
作者： Suria Mohd Saad，Jaafar Abdullah，Suraya Abd Rashid，Yap Wing Fen，Faridah Salam，Lau Han Yih
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研究概述 实验方案 设备清单

研究目的

本研究的目的是设计一种专门用于检测fliC基因的荧光测定法。编码大肠杆菌结构鞭毛抗原（H7）的fliC基因可对最常与疾病相关的H7血清型进行基因分型鉴定。

研究成果

基于荧光猝灭原理，成功设计出一种灵敏且实用的荧光检测方法用于大肠杆菌O157:H7的检测。该方法具有灵敏度高、选择性强和定量能力显著等特点，证实其在食品安全领域识别致病菌方面具有应用潜力。

研究不足

该系统需要约4小时的长时间追踪，且由于空间位阻效应，对长目标序列样本的分析稳定性不足。此外，样本需送至实验室并使用专用仪器，因此不适用于即时检测应用场景。

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