研究目的
研究基于中性粒细胞的活体探针的构建及其在肿瘤精准成像诊断中的应用。
研究成果
基于中性粒细胞的活体探针在肿瘤部位显示出比纳米颗粒成像剂更快的靶向性和更强的聚集能力，表明其在精准肿瘤诊断应用中具有巨大潜力。该研究强调了利用细胞天然生物特性以增强成像和诊断能力的重要性。
研究不足
该研究的局限性在于中性粒细胞采集存在潜在变异性，且需要进一步优化纳米颗粒偶联以确保对中性粒细胞功能的影响最小化。此外，这些发现向临床应用的转化还需深入研究。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用细胞表面工程策略构建了基于中性粒细胞的肿瘤活体成像探针。通过TNB介导的二硫键-巯基交换反应，将负载成像剂（钆和BODIPY）的BSA纳米颗粒共价固定于中性粒细胞表面。
2：样本选择与数据来源：
从小鼠BALB/c品系腹腔中采集中性粒细胞，修饰纳米颗粒前后分别检测其纯度与功能活性。
3：实验设备与材料清单：
包含牛血清白蛋白(BSA)、钆(Gd)、BODIPY、5-硫基-2-硝基苯甲酸(TNB)及流式细胞术/共聚焦显微镜所需抗体。
4：实验流程与操作步骤：
将中性粒细胞与DTNB活化的BSA纳米颗粒孵育，检测所得中性粒细胞探针的生物特性（细胞活性、形态及体内趋化性），并利用荧光/MR成像评估其在小鼠肺癌模型中的肿瘤靶向效能。
5：数据分析方法：
采用流式细胞术、共聚焦激光扫描显微镜及MR成像分析数据，统计检验使用单/双因素方差分析。
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bovine serum albumin
BSA
Sigma-Aldrich
Used as a scaffold for loading imaging agents (Gd and BODIPY) onto nanoparticles.
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BODIPY 650/665-X N-hydroxysuccinimide ester
BODIPY 650/665-X NHS ester
Life Technologies
Used as an imaging agent loaded onto BSA nanoparticles.
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FITC-conjugated CD11b antibody
eBiosciences
Used for flow cytometry analysis to evaluate the expression of CD11b on neutrophils.
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R-phycoerythrin (PE)/Cy7-conjugated Ly-6G antibody
BioLegend
Used for flow cytometry analysis to evaluate the purity of neutrophils.
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Annexin V-FITC apoptosis detection kit
Beyotime
Used to detect the viability of nanoparticle-remodeled neutrophils.
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cell counting kit-8
CCK-8
Beyotime
Used to estimate the in vitro cytotoxicity of Gd@BSA NPs.
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Giemsa stain kit
Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute
Used to stain neutrophils for morphological observation.
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red blood cell lysis buffer
RBC lysis buffer
Peprotech-BioGems
Used to lyse red blood cells during neutrophil collection.
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