研究目的
提出一种通过激光诱导加热和介电泳技术，在单细胞水平上精确复制并检测来自单个细胞的DNA链目标位置的方法。
研究成果
开发的微流控平台成功实现了局部DNA序列的原位高效复制，并以高灵敏度检测微量产物。该技术可用于农业生物学中快速进行新植物品种的基因测序。
研究不足
该方法在电极上拉伸和固定DNA的量方面可能存在局限性，尤其是对于更高的热循环次数，这导致荧光强度计算中的误差条更大。由于数量不足，凝胶电泳无法检测到复制的产物。
1：实验设计与方法选择：
本研究整合激光诱导加热与介电泳技术，开发了用于原位复制和检测目标DNA序列的微流控平台。通过制造铝电极来拉伸并固定DNA链，利用激光诱导加热实现局部DNA序列的热循环扩增。
2：样本选择与数据来源：
以λDNA作为实验样本，并用核酸荧光染料进行标记。设计了生物素化引物用于DNA扩增。
3：实验设备与材料清单：
包含红外激光器、荧光显微镜、电荷耦合器件相机，以及抗生物素蛋白、牛血清白蛋白和量子点等化学试剂。
4：实验流程与操作步骤：
包括用抗生物素蛋白包被盖玻片、通过介电泳拉伸固定DNA、采用激光诱导加热进行DNA复制，以及利用量子点检测产物。
5：数据分析方法：
通过计算量子点的荧光强度来检测复制的DNA产物。
独家科研数据包，助您复现前沿成果，加速创新突破
获取完整内容-
Infrared laser
1455 nm, CW, Raman fibre laser
IPG Laser GmbH
Heating source for inducing thermal cycles
-
Fluorescence microscope
BX-51
Olympus
Observation and recording of experimental images
-
Charge-coupled device camera
C7190-23
Hamamatsu
Recording experimental images
-
Quantum dots
Qdot 655 streptavidin conjugate
Life Technologies Co.
Detection of replicated DNA products
-
Nucleic acid fluorescent dye
YO-PRO-1
Invitrogen Co.
Dyeing the DNA sample
-
登录查看剩余3件设备及参数对照表
查看全部
