1：实验设计与方法选择：

FLASH PCR系统基于DNA嵌入染料（DIDs）可通过光诱导产生单线态氧促进显色底物快速光氧化的原理设计。该原理被用于将基于DID的荧光PCR检测转化为比色FLASH PCR。

2：样本选择与数据来源：

使用与乙型肝炎病毒表面蛋白基因（HBV-S）亚序列对应的合成DNA标准品，以及包括土壤传播蠕虫（STH）感染在内的临床样本。

3：实验设备与材料清单：

SYBR Green I染料、3,3’5,5’-四甲基联苯胺（TMB）、磷酸盐缓冲盐水（PBS）、吐温20、柠檬酸钠、柠檬酸溶液、盐酸、鲱鱼精子DNA、Taq 2× PCR Master Mix、iTaql Universal SYBR Green Supermix、TEMED、过硫酸铵、丙烯酰胺/双丙烯酰胺溶液、DNA上样缓冲液、20 bp DNA阶梯、Luna Universal qPCR Master Mix、Monarch PCR & DNA纯化试剂盒、Phusion血液直扩PCR试剂盒、QIAamp循环核酸试剂盒、QIAprep Spin Miniprep试剂盒、QuntiFluor dsDNA定量试剂盒。

4：柠檬酸钠、柠檬酸溶液、盐酸、鲱鱼精子DNA、Taq 2× PCR Master Mix、iTaql Universal SYBR Green Supermix、TEMED、过硫酸铵、丙烯酰胺/双丙烯酰胺溶液、DNA上样缓冲液、20 bp DNA阶梯、Luna Universal qPCR Master Mix、Monarch PCR & DNA纯化试剂盒、Phusion血液直扩PCR试剂盒、QIAamp循环核酸试剂盒、QIAprep Spin Miniprep试剂盒、QuntiFluor dsDNA定量试剂盒。 实验流程与操作步骤：

4. 实验流程与操作步骤：将PCR扩增产物与SG-I和TMB在柠檬酸盐缓冲液中混合，使用96孔FLASH阵列或便携式FLASH读数仪进行照射。每次5秒照射后测量650 nm吸光度或红色通道比色信号。

5：数据分析方法：

通过比较FLASH检测的检测限（LOD）与传统基于DID的荧光开启检测及商业定量PCR的检测限，评估FLASH检测的分析性能。