研究目的
研究基于DNA的可交换荧光标记物在STED显微镜中的应用，以规避光漂白问题并实现全细胞的多色及三维成像。
研究成果
该研究展示了一种简单而强大的STED显微镜细胞实验方案，通过基于DNA的、靶向特异性的可交换荧光标记物来避免光漂白。这一概念支持高对比度的多色和三维成像，有利于长时间采集的活细胞成像。
研究不足
该方法目前仅限于少量标签，且无法靶向细胞中的任意蛋白质。由于对噪声更敏感，动态标签的分辨率略低于共价标签。
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利用DNA标记抗体实现细胞内蛋白质特异性、多色及三维STED成像
DOI：10.1002/ange.201910115
期刊：Angewandte Chemie
出版年份：2019
更新时间：2025-09-19 17:13:59
摘要：
光漂白是荧光显微镜面临的主要挑战，尤其是使用高强度激发光时。这可能导致信噪比和空间分辨率下降，从而限制从图像中提取的信息量。通过采用可交换标记物——这些标记物能短暂结合并脱离目标分子，从而用储备池中的完整标记物替换已破坏的标记物——可以规避光漂白问题。本研究展示了利用短链荧光标记寡核苷酸进行共聚焦和STED显微镜成像的技术，这些寡核苷酸能短暂结合于连接蛋白特异性抗体的互补寡核苷酸上?；贒NA的STED成像中荧光标记物的持续交换，有效规避了共价标记物产生的光漂白现象。实验证明该技术适用于完整细胞的双色靶向STED成像。
作者：
Christoph Spahn，Florian Hurter，Mathilda Glaesmann，Christos Karathanasis，Marko Lampe，Mike Heilemann
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