研究目的
开发一种简单高效的金属硫蛋白(MT)富集与检测方法,以解决传统流程耗时且复杂的问题。
研究成果
所开发的方法将Fe3O4@Au核壳纳米颗粒与质谱技术相结合,为MT的富集和鉴定提供了一种简单、快速且灵敏的途径,在蛋白质组学及相关领域具有潜在应用价值。
研究不足
该方法的有效性取决于MT的浓度,检测限为10飞克每毫升。在较高MT浓度下,纳米颗粒表面的饱和可能会限制富集效率。
1:实验设计与方法选择
通过金-硫相互作用制备用于富集金属硫蛋白(MT)的核壳纳米颗粒(Fe3O4@Au NPs),并采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/MS)进行鉴定。
2:样本选择与数据来源
使用标准兔肝金属硫蛋白和牛血清白蛋白(BSA)制备蛋白质混合溶液。
3:实验设备与材料清单
尼高力iS5红外光谱仪、JEM-2010透射电子显微镜、RW20DZM.n电子恒速搅拌器、UV-2540紫外-可见分光光度计、布鲁克·道尔顿MALDI-TOF/MS、Zetasizer Nano-ZS90电位计、X射线衍射仪。
4:实验流程与操作步骤
合成Fe3O4纳米颗粒并包覆金层形成核壳纳米颗粒,随后利用该纳米颗粒从蛋白质混合物中富集MT,最后进行MALDI-TOF/MS分析。
5:数据分析方法
通过MALDI-TOF/MS分析富集的蛋白质以鉴定MT,并评估检测限和特异性。
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Nicolet iS5 Infrared Spectrometer
iS5
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UV-2540 UV-visible Spectrophotometer
UV-2540
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Bruker Daltonics MALDI-TOF/MS
MALDI-TOF/MS
Bruker Daltonics
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JEM-2010
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