研究目的
利用拉曼和相干反斯托克斯拉曼散射(CARS)显微镜技术,研究肝窦内皮细胞和肝细胞摄取油酸与棕榈酸后脂滴(LDs)的形成过程,并明确与脂质积累代谢相关的脂滴化学成分变化。
研究成果
该研究提供了关于脂滴及其在肝窦内皮细胞和肝细胞中空间分布的详细化学信息,揭示了两种细胞类型在处理油酸和棕榈酸方面的差异。这种方法为肝脏细胞中脂肪酸的命运提供了新见解,与代谢性疾病(如非酒精性脂肪性肝病)相关。
研究不足
该研究聚焦于体外模型,可能无法完全复现体内环境。所采用的具体浓度与时间范围或难以涵盖所有生理情境。
1:实验设计与方法选择:
采用拉曼和相干反斯托克斯拉曼散射(CARS)显微技术研究内皮细胞和肝细胞在油酸与棕榈酸暴露后的脂滴形成过程。
2:样本选择与数据来源:
使用小鼠细胞系TSECs(作为LSECs模型)和AML-12(作为肝细胞模型)。
3:实验设备与材料清单:
WITec Alpha 300R共聚焦拉曼显微镜、CARS显微系统、氟化钙载玻片、玻璃底培养皿、油酸、棕榈酸、牛血清白蛋白(BSA)。
4:实验流程与操作步骤:
细胞经脂肪酸孵育、固定后,通过拉曼和CARS成像分析。
5:数据分析方法:
拉曼光谱通过WITec Project Plus和OPUS软件分析;CARS图像使用ImageJ处理。
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获取完整内容-
WITec Alpha 300R Confocal Raman Microscope
Alpha 300R
WITec
Used for Raman imaging to follow changes in the distribution of lipids after incubation with fatty acids.
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CARS microscopy system
Used for selective imaging of lipids in a large group of cells.
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CaF2 slides
Used for Raman measurements.
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Glass bottom dishes
Used for CARS microscopy.
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Oleic acid
Sigma Aldrich
Used for incubation with cells to study LDs formation.
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Palmitic acid
Sigma Aldrich
Used for incubation with cells to study LDs formation.
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Bovine Serum Albumin (BSA)
Sigma Aldrich
Used as a solution with fatty acids for cell culture medium.
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