研究目的
报道一种新型实验性质谱成像(MSI)技术"激光烧蚀-远程电喷雾电离"(LARESI)的研发进展,并展示人体组织的独特质谱成像结果——即对包含癌变与非癌变区域的冷冻肾脏组织进行LARESI选择性反应监测(SRM)靶向MS/MS成像。
研究成果
该研究证明了新型环境LARESI SRM/MRM MSI方法用于研究和发现人体组织中癌症生物标志物的适用性。该方法为复杂生物样本提供了无需预处理的直接化学成像途径,具有快速准确检测肿瘤标记物的潜力。
研究不足
该研究受限于组织样本数量较少以及仅关注特定一组代谢物。两种质谱成像方法的比较尚属初步,需通过更大样本量进一步验证。
1:实验设计与方法选择
LARESI SRM MSI实验装置专为肾癌组织中目标代谢物的成像而开发。该方法采用红外激光进行消融,并通过电喷雾电离产生离子,连接至以SRM或MRM模式运行的串联质谱仪。
2:样本选择与数据来源
对三名肾细胞癌(RCC)患者提供的四份含癌变与非癌变区域的组织样本进行成像分析。基于文献报道的癌变与非癌变区域丰度差异,选取了十六种内源性代谢物进行研究。
3:实验设备与材料清单
Nd/YAG泵浦可调谐OPO激光器(IR Opolette 2731-HE;Opotek)、SCIEX QTRAP 5500质谱仪、银-109纳米颗粒、不锈钢靶材、HPLC级溶剂。
4:实验流程与操作步骤
使用切片机切割组织切片并固定于-18°C的珀尔帖载物台上。采用LARESI SRM MSI和109AgNPET LDI MSI方法进行成像,空间分辨率范围为175至300微米。
5:数据分析方法
通过分析质谱图像,比较癌变与非癌变区域间选定代谢物的丰度差异。数据处理使用论文所述软件完成。
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