研究目的
开发一种基于细胞内信号放大的微流控毛细管电泳-激光诱导荧光（MCE-LIF）方法，用于定量单细胞内的ATP含量。
研究成果
该方法为在单细胞水平研究ATP的生物医学功能及相关疾病的早期诊断提供了一种有效工具。
研究不足
该方法需要特定的信号放大条件，未经优化可能不适用于所有细胞类型。
1：实验设计与方法选择：
开发了一种细胞内信号放大策略，使用羧基荧光素标记的ATP适配体作为靶探针（TP），脂质体作为载体将TP和外切酶III递送至细胞内，并采用荧光素（FAM）标记的TP选择性识别ATP并产生荧光信号。
2：样本选择与数据来源：
使用Hela、HepG2和HL-7702细胞系。
3：实验设备与材料清单：
激光诱导荧光检测微芯片电泳、脂质体、外切酶III、ATP适配体。
4：实验流程与操作步骤：
细胞与封装TP和外切酶III的脂质体共孵育，随后裂解并进行MCE-LIF分析。
5：数据分析方法：
通过MCE-LIF条件分析，包括电泳缓冲液pH值、硼砂和SDS浓度及分离电压。
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microchip electrophoresis
Used for the separation and analysis of ATP in single cells.
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laser induced fluorescence detection
Used for the sensitive detection of fluorescent signals generated from ATP quantification.
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liposomes
Used as carriers for transporting the target probe and exonuclease III into cells.
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exonuclease III
Used for catalyzing the hydrolysis of the target probe to release ATP and fluorescent FAM.
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ATP aptamer
Used as the target probe for selective identification of ATP and generation of fluorescent signals.
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