研究目的
研究蓝光LED诱导小鼠光感受器衍生细胞损伤与死亡的分子机制，重点关注溶酶体生物发生及溶酶体介导的细胞死亡。
研究成果
蓝光通过氧化应激和钙依赖性的TFEB通路，在小鼠光感受器来源细胞中诱导溶酶体生物发生及溶酶体细胞死亡。这些发现凸显了溶酶体稳态对眼睛功能及视网膜疾病的重要性。
研究不足
该研究仅限于使用小鼠光感受器衍生细胞的体外模型，可能无法完全复制人类视网膜的反应。蓝光LED与溶酶体损伤及细胞死亡之间的具体通路尚需进一步阐明。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用661W小鼠光感受器来源细胞评估蓝光LED对溶酶体的影响。通过蓝光LED照射细胞，并利用LysoTracker染色、免疫印迹和实时PCR评估溶酶体变化。
2：样本选择与数据来源：
选择661W细胞因其表达视锥细胞特异性抗原。数据通过细胞成像、PCR和免疫印?；袢?。
3：实验设备与材料清单：
设备包括Lionheart FX全自动显微镜、Zeiss LSM700显微镜和NEPA21超级电穿孔仪。材料包括LysoTracker、Hoechst33342、碘化丙啶及多种抗体。
4：碘化丙啶及多种抗体。 实验步骤与操作流程：
4. 实验步骤与操作流程：细胞接受蓝光或绿光LED照射，染色标记溶酶体与细胞核后成像。评估TFEB核转位情况并分析溶酶体基因表达。
5：数据分析方法：
使用Gen5软件、ImageJ和SPSS Statistics软件进行数据分析以确定统计学显著性。
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LysoTracker
Red DND-99
Thermo Fisher Scientific
Visualizing acidic compartments in cells
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Hoechst33342
Thermo Fisher Scientific
Staining nuclei
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Lionheart FX Automated Microscope
Bio Tek Instruments
Cell imaging
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Zeiss LSM700 microscope
Carl Zeiss
Cell imaging
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NEPA21 Super Electroporator
Nepa Gene
Cell transfection
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