研究目的
为了开发具有更高动态范围的荧光成像采集技术,重点研究一种新的高动态范围共聚焦与双光子显微镜技术方案,以扩展荧光光学扫描显微镜的成像动态范围。
研究成果
高动态范围荧光成像技术的发展已被证明能提升生物样本中暗淡与明亮结构的可视化效果,从而实现对荧光团浓度的精确测量,并通过改进细胞和树突结构的图像分割获得更优的定量分析。这些技术有望在全器官水平的细胞分布信息获取及活体药物药代动力学定量研究中发挥重要作用。
研究不足
当前光电探测器和成像CCD的有限动态范围,以及在不同荧光强度的生物样本中准确分割和量化细胞与树突结构的挑战。
1:实验设计与方法选择:
该方法采用多曝光采集策略结合融合算法,将摄影原理延伸至荧光显微镜领域。
2:样本选择与数据来源:
具有不同荧光蛋白表达程度或荧光标记抗体染色的生物样本。
3:实验设备与材料清单:
包括共聚焦与双光子显微镜系统、光电探测器、成像CCD及荧光分子断层扫描系统。
4:实验流程与操作步骤:
获取不同饱和度的图像,表征传感器响应特性,融合图像生成覆盖更大动态范围的单一非饱和图像。
5:数据分析方法:
运用图像融合算法、传感器响应校正及动态范围压缩技术以实现可视化显示。
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photodetectors
Detecting fluorescence intensities in imaging.
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imaging CCDs
Capturing fluorescence images during acquisition.
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confocal microscopy
High-resolution imaging of biological samples.
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two-photon microscopy
Deep tissue imaging with reduced photodamage.
-
fluorescence molecular tomography systems
3D imaging of fluorescence activity in whole small animal bodies.
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