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专业探针提供超分辨率成像,那种特殊的闪烁效果。

DOI:10.1038/s41592-018-0231-8 期刊:Nature Methods 出版年份:2018 更新时间:2025-09-23 15:21:21
摘要: 荧光探针为观察细胞细节照亮了道路,但光线本身也可能成为障碍。由于衍射极限的限制,间距小于约200纳米的结构无法被分辨。除非使用具有超分辨率成像功能的探针。这些技术——如可逆饱和线性荧光跃迁(RESOLFT)、光激活定位显微镜(PALM)/随机光学重建显微镜(STORM)——采用能实现明暗转换及颜色切换的特殊探针、染料和荧光蛋白(FPs)。"我们需要将标记物与显微镜结合来突破衍射屏障,"在哥廷根大学医学中心和马克斯·普朗克生物物理化学研究所研发探针的Stefan Jakobs表示。他指出,在结构光照明显微镜(SIM)中,实验室通??墒迪?00纳米分辨率;而采用受激发射损耗显微镜(STED)、RESOLFT、PALM或STORM技术的科学家则能突破50纳米分辨率。原则上,这些方法不受衍射限制。
作者: Vivien Marx
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研究在超分辨率成像中使用特种探针以突破衍射极限,实现超过200纳米的细胞细节观察。

该论文得出结论:随着探针和成像技术的进步,活细胞超分辨率成像有望成为常规技术。研究强调了开发光开关和光转换荧光蛋白(FPs)对多色实验及深度成像技术的重要性。

该论文提到了活细胞成像中光毒性的挑战、红色探针相较于绿色探针性能的局限,以及需要推进探针和成像模式的发展以减少光漂白、提高速度并增加从活细胞记录的图像数量。

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