研究目的
开发一种用于检测顺铂的比率荧光探针，并研究生物体系中Pt(IV)前药复合物的细胞内还原过程。
研究成果
成功研发了比率型探针RDC1，用于区分Pt(II)和Pt(IV)配合物，从而实现对铂(IV)前药配合物细胞内还原过程的研究。该研究表明，与传统认知相反，谷胱甘肽并非顺铂类铂(IV)前药配合物的主要细胞还原剂。RDC1是理解铂(IV)前药配合物在细胞水平上代谢过程的重要工具。
研究不足
该研究聚焦于HeLa细胞中Pt(IV)前药复合物的胞内还原过程及谷胱甘肽的作用，但未探究其他潜在的细胞还原剂，也未评估该探针在不同细胞系或体内的更广泛适用性。
1：实验设计与方法选择：
该比率型探针的设计基于香豆素-466（Cou466）/罗丹明-6G（Rho6G）二联体结构，并引入二硫代氨基甲酸酯（DTC）识别基团。
2：样本选择与数据来源：
采用HeLa细胞研究抗癌Pt(IV)前药复合物的细胞内活化过程。
3：实验仪器与材料清单：
探针RDC1通过1H NMR、13C{1H} NMR及ESI-MS进行制备与表征。
4：实验步骤与操作流程：
在CH?CN/HEPES缓冲液中考察RDC1的光物理性质。将HeLa细胞用不同浓度顺铂和Pt(IV)复合物处理后，经多聚甲醛固定并与RDC1孵育。
5：数据分析方法：
使用ImageJ软件测定细胞内荧光强度，还原比Rred定义为荧光强度比值I565/I470。
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获取完整内容-
coumarin-466
Fluorophore component of the ratiometric probe
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rhodamine-6G
Fluorophore component of the ratiometric probe
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dithiocarbamate
Recognition motif for Pt(II) sensing
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HEPES buffer
Buffer solution for photophysical properties investigation
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paraformaldehyde
Fixative for cell treatment
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ImageJ software
Software for determining intracellular fluorescence intensities
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