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福尔马林固定石蜡包埋样本中肽类物质的MALDI-MSI技术:位点间重现性与空间分辨率

DOI:10.1002/prca.201800029 期刊:PROTEOMICS - Clinical Applications 出版年份:2018 更新时间:2025-09-23 15:21:21
摘要: 目的 为推动基质辅助激光解吸电离质谱成像(MALDI-MSI)从基础研究向临床应用过渡,需对福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织进行分析。本研究旨在优化FFPE样本的MALDI-MSI原位胰蛋白酶消化流程,并验证不同取样部位能否获得可重复的相似结果。 实验设计 对小鼠肠道、人卵巢畸胎瘤及来自三个不同部位的肿瘤实体组织微阵列等FFPE组织进行MALDI-MSI制备。采用自动化喷雾装置将胰蛋白酶包被于样本表面,通过潮解作用维持稳定湿润环境进行孵育。消化后使用相同喷雾设备喷涂α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA),并在50μm空间分辨率下通过rapifleX MALDI Tissuetyper质谱仪分析。数据采用flexImaging、SCiLS和R软件处理。 结果 胰蛋白酶应用与消化过程是导致FFPE样本MALDI-MSI空间分辨率下降及变异的主要因素。通过本工作流程可区分不同组织中的离散组织学特征,且经空间分割与主成分分析评估,不同取样部位生成的图像质量具有相似性。 结论与临床意义 遵循标准化MALDI-MSI工作流程可保持空间分辨率及跨部位重现性。
作者: Alice Ly,Rémi Longuespée,Rita Casadonte,Petra Wandernoth,Kristina Schwamborn,Christine Bollwein,Christian Marsching,Katharina Kriegsmann,Carsten Hopf,Wilko Weichert,J?rg Kriegsmann,Peter Schirmacher,Mark Kriegsmann,S?ren-Oliver Deininger
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研究概述 实验方案 设备清单

为推动基质辅助激光解吸电离质谱成像(MALDI-MSI)从基础研究向临床应用过渡,需对福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织进行分析。本研究旨在优化FFPE样本的MALDI-MSI原位胰蛋白酶消化方法,并验证不同实验地点能否获得可重复的相似结果。

通过遵循标准化的MALDI-MSI工作流程,可以保持空间分辨率和位点间重现性。

FFPE样本制备用于MALDI-MSI被认为耗时长且流程复杂,需长达两天的准备工作。与传统显微镜技术相比,其空间分辨率较低且MALDI-MSI分析所需时间更长。

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