研究目的
在使用光动力疗法(PDT)治疗致命性肿瘤时,通过联合应用两种苯并卟啉衍生物(BPD)脂质体制剂,在保持治疗效果的同时降低对正常组织的毒性。
研究成果
维速达尔与脂锚定BPD脂质体的联合使用,在三维卵巢癌模型中通过以低于任一光敏剂单独使用时的光照剂量,实现对溶酶体和线粒体/内质网的同时光损伤,显著提升了光动力疗法的疗效。该方法在保持治疗效果的同时,具有降低正常组织毒性的潜力。
研究不足
该研究仅限于卵巢癌的体外3D模型,其发现需要在动物模型和临床环境中进行验证。各种给药方案及多次光动力治疗周期的影响尚未充分探究。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用两种BPD脂质体制剂——维替泊芬(Visudyne)和实验室自制的脂锚定BPD脂质体,通过单一波长光照靶向不同亚细胞器(线粒体、内质网和溶酶体)实现同步光损伤。
2:样本选择与数据来源:
使用人卵巢癌细胞NIH:OVCAR5(OVCAR5),在生长因子减少(GFR)的Matrigel基质上进行三维培养。
3:实验设备与材料清单:
设备包括690nm二极管激光器(用于照射)、Operetta CLS高内涵成像分析系统(用于成像)以及Zetasizer Nano ZS动态光散射仪(用于脂质体表征)。材料包含维替泊芬、脂锚定BPD脂质体及多种用于脂质体制备的脂类和化学试剂。
4:实验流程与操作步骤:
细胞经光敏剂制剂处理后,以特定能量密度光照,并通过检测mCherry荧光评估治疗反应。
5:数据分析方法:
图像分析采用Harmony 4.6软件,统计分析使用GraphPad Prism 7软件。
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Visudyne
Bausch + Lomb
Clinically-approved liposomal formulation of benzoporphyrin derivative (BPD) used in photodynamic therapy to target mitochondria and endoplasmic reticulum.
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lipid-anchored BPD liposome
In-house liposomal formulation of BPD conjugated to a lipid, designed to target lysosomes for photodynamic therapy.
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690nm diode laser
Model 7404
Intense Inc.
Used for irradiating the photosensitizers in photodynamic therapy.
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Operetta CLS High Content Image Analysis System
Perkin Elmer
Used for imaging and quantifying mCherry fluorescence in treated cells.
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Zetasizer Nano ZS Dynamic Light Scattering Instrument
Malvern Instruments, Ltd.
Used for measuring hydrodynamic diameters and ζ-potentials of liposomes.
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