研究目的
利用寿命编码微球,通过紧凑型装置和简单的时域测量来评估流式细胞术中寿命编码的可行性和局限性。
研究成果
研究得出结论,所提出的LT-FCM平台能够区分不同的寿命编码,在当前使用单一激发波长和单一检测通道的寿命编码性能水平下,可实现对包含有机和无机荧光团的五种编码的区分。通过技术改进,其区分能力有望进一步提升。
研究不足
该研究承认需要通过技术改进来提升区分能力,例如采用具有更优动态范围的探测器、针对每个物体灵活调整测量时间窗口,以及进行软件升级。
1:实验设计与方法选择:
本研究开发了一种基于紧凑型装置和直接时域测量的时间分辨流式细胞仪平台。
2:样本选择与数据来源:
采用负载不同有机荧光团和半导体量子点的寿命编码发光微球作为模型系统。
3:实验设备与材料清单:
设计了一台定制化流式细胞仪(LT-FCM),包含调制激光光源、新型单光子信号处理寿命分析电子器件及信号分析与仪器控制软件。
4:实验流程与操作步骤:
通过电子调节鞘液压力改变编码微球与聚焦激发激光光斑的相互作用时间。
5:数据分析方法:
利用经典公式从强度衰减曲线计算荧光寿命,并基于合成衰减曲线进行数值模拟以研究测量参数与条件的影响。
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