研究目的
利用大肠杆菌BL21(DE3)菌株及其改良的ClearColi?菌株从人血清中分离抗LPS抗体,并通过荧光和电化学检测方法证明其在检测革兰氏阴性菌中的应用价值。
研究成果
分离出的抗LPS抗体对携带LPS的细菌表现出选择性结合,并有效应用于荧光和电化学检测革兰氏阴性菌的实验中。该方法为细菌感染检测提供了一种潜在途径。
研究不足
该研究仅限于使用分离的抗脂多糖(LPS)抗体对革兰氏阴性菌进行体外检测,未探索其在临床或环境样本中的适用性。
1:实验设计与方法选择:
本研究通过大肠杆菌BL21(DE3)和ClearColi?从人血清中分离抗LPS抗体,随后对其进行表征并应用于免疫检测。
2:样本选择与数据来源:
人血清作为抗LPS抗体的来源。实验培养了大肠杆菌菌株BL21(DE3)和ClearColi?。
3:实验设备与材料清单:
包括FACSCalibur分析仪、Monolith NT.115仪器、Victor X5酶标仪及各类化学试剂。
4:实验步骤与操作流程:
分离过程包括将血清蛋白结合至BL21(DE3)、酸解离、ClearColi过滤及蛋白A柱层析分离。
5:3)、酸解离、ClearColi过滤及蛋白A柱层析分离。 数据分析方法:
5. 数据分析方法:采用流式细胞术和热泳免疫分析法进行分析。
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获取完整内容-
FACSCalibur analyzer
Becton-Dickinson Co
Used for flow cytometry analysis to confirm the selective binding of anti-LPS antibodies to LPS-carrying bacteria.
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Monolith NT.115 instrument
Nanotemper Technologies
Used for thermophoretic immunoassay to estimate the dissociation constant of the separated anti-LPS antibodies.
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Victor X5 plate reader
Perkin Elmer
Used for measuring fluorescence in the fluorescence immunoassay of BL21(DE3).
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ClearColi?
Used for filtering dissociated proteins to remove unwanted proteins in the separation process of anti-LPS antibodies.
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