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利用从人血清中分离的抗脂多糖抗体对大肠杆菌进行荧光免疫分析

DOI:10.1016/j.bios.2018.10.036 期刊:Biosensors and Bioelectronics 出版年份:2019 更新时间:2025-09-10 09:29:36
摘要: 本研究中,采用革兰氏阴性菌大肠杆菌BL21(DE3)菌株(其外膜含有脂多糖LPS)及其改良型ClearColi?菌株(不含LPS),通过以下步骤从人血清中分离抗LPS抗体:(1) 血清蛋白与BL21(DE3)结合;(2) 用酸解离BL21(DE3)上结合的蛋白(包括抗LPS抗体);(3) 利用ClearColi过滤解离蛋白以去除杂蛋白;(4) 通过蛋白A柱层析分离抗体组分。采用荧光激活细胞分选法分析分离抗体的结合特性,证实其能选择性结合BL21(DE3)外膜上的LPS,并通过热泳免疫分析法测定其解离常数。将抗体固定于修饰微孔板表面后,通过荧光检测BL21(DE3)验证了分离抗LPS抗体的体外适用性。将抗LPS抗体固定于金电极后,也实现了对BL21(DE3)的电化学检测。
作者: Ji-Hong Bong,Jiyun Kim,Ga-Yeon Lee,Jun-Hee Park,Tae-Hun Kim,Min-Jung Kang,Jae-Chul Pyun
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研究概述 实验方案 设备清单

利用大肠杆菌BL21(DE3)菌株及其改良的ClearColi?菌株从人血清中分离抗LPS抗体,并通过荧光和电化学检测方法证明其在检测革兰氏阴性菌中的应用价值。

分离出的抗LPS抗体对携带LPS的细菌表现出选择性结合,并有效应用于荧光和电化学检测革兰氏阴性菌的实验中。该方法为细菌感染检测提供了一种潜在途径。

该研究仅限于使用分离的抗脂多糖(LPS)抗体对革兰氏阴性菌进行体外检测,未探索其在临床或环境样本中的适用性。

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