研究目的
开发一种具有聚集诱导发光(AIE)特性的荧光"开启"型碱性磷酸酶(ALP)检测探针,用于水相介质及活细胞中的检测应用。
研究成果
该研究成功开发了一种具有良好水溶性和长波长发射的AIE活性荧光探针,用于碱性磷酸酶(ALP)检测。该探针在水溶液中表现出对ALP的高灵敏度和高选择性,并有效应用于活细胞中ALP的成像。这项工作为设计其他酶的检测策略提供了见解。
研究不足
该研究聚焦于碱性磷酸酶(ALP)的检测及其在细胞成像中的应用,但未探究该探针在更复杂的生物系统或体内的性能表现。虽已证实该探针对ALP相较于其他酶具有特异性,但其在复杂生物样本中可能存在的干扰因素尚未充分研究。
1:实验设计与方法选择:
合成了具有D-A-D结构并包含氰基和磷酸基团的探针TPE-CN-pho。设计原理是通过实现高共轭度和良好水溶性来获得更长波长的发射。
2:样本选择与数据来源:
在Tris缓冲液(10 mM,pH 8.0)中测试了探针对ALP的响应。细胞成像实验使用了HeLa、L929和HepG2细胞。
3:0)中测试了探针对ALP的响应。细胞成像实验使用了HeLa、L929和HepG2细胞。 实验仪器与材料清单:
3. 实验仪器与材料清单:仪器包括布鲁克Avance 600 MHz核磁共振仪、日立F4600荧光分光光度计和奥林巴斯IX 71荧光显微镜。材料包括牛肠黏膜来源的ALP、EDTA及各种化学试剂。
4:实验步骤与操作流程:
将探针在37°C下孵育后测量其对ALP的荧光响应。细胞成像实验通过将细胞与探针孵育并观察荧光进行。
5:数据分析方法:
记录荧光光谱,并使用动态光散射(DLS)进行粒径分析。
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