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利用多重高通量荧光原位杂交技术绘制果蝇全脑神经递质分布图谱

DOI：10.1534/genetics.118.301749 期刊：Genetics 出版年份：2018 更新时间：2025-11-21 11:08:12
摘要： 识别特定神经元所使用的神经递质是理解神经回路功能的关键步骤。然而，目前用于一致且高效检测神经递质标记物的方法仍十分有限。荧光原位杂交技术（FISH）能直接标记神经元中特定类型的信使RNA。该技术的最新进展使其能在完整组织样本（如果蝇全脑标本）中实施。我们在此展示一个用于高通量检测果蝇大脑中八种常见神经递质表型的FISH平台。通过处理载玻片上的样本并优化每种探针的荧光团选择以实现多重检测，我们大幅提高了FISH通量。作为应用实例，我们展示了神经递质共表达的情况，揭示了特定细胞类型的神经递质表型，并探究了发育中视叶的神经递质表达起始阶段。除神经递质标记物外，我们的方案原则上可用于果蝇全脑中任何信使RNA的大规模FISH检测。
作者： Geoffrey W. Meissner，Aljoscha Nern，Robert H. Singer，Allan M. Wong，Oz Malkesman，Xi Long
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研究概述 实验方案 设备清单

研究目的

开发一种高通量、可多重化的荧光原位杂交（FISH）平台，用于鉴定完整果蝇中枢神经系统中的神经递质细胞类型，实现对八种不同神经递质表型的可靠检测。

研究成果

FISH平台能高效检测果蝇大脑中的八种神经递质表型，具有高通量与多重分析能力。该技术可精准定位特定细胞类型，适用于发育研究及其他基因表达分析，为神经科学研究提供了重要工具。

研究不足

标记物的表达并不总是意味着递质表型（例如，神经元可能通过摄取获得递质）；并非所有潜在递质都被涵盖（例如，甘氨酸）；某些神经元中信号强度有限，难以进行精确计数。

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