研究目的
利用荧光染料和动力学分析研究活细胞质膜中脂质微区的存在。
研究成果
该研究展示了一种利用荧光染料和MEM分解技术检测活细胞质膜异质性的新动力学方法，始终揭示出两个分别归属于液态有序相和液态无序相脂质的指数成分，为脂质微区共存提供了证据。
研究不足
该技术在检测两种以上脂质相或不同细胞类型时可能存在局限性。需要进一步研究以理解该技术的优势和不足。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用荧光染料在细胞膜中结合与扩散的动力学测量，并通过最大熵法（MEM）分解以识别指数成分。实验包括三类：光谱分析、流式细胞术和光漂白后荧光恢复（FRAP）。
2：样本选择与数据来源：
培养人组织细胞淋巴瘤Jurkat细胞和人上皮腺癌细胞HeLa，使用含胎牛血清和抗生素的RPMI 1640培养基。荧光探针包括NR12S、bNR10S、bQ10S和F2N12SM。
3：2S、bNR10S、bQ10S和F2N12SM。 实验设备与材料清单：
3. 实验设备与材料清单：设备包括PTI QuantaMaster 40荧光分光光度计、BeckmanCoulter EpicsXL流式细胞仪、ZEISS LSM 780-FCS共聚焦显微镜，以及Matlab和ImageJ软件。材料包括细胞培养基、荧光染料和林格氏液。
4：实验流程与操作步骤：
光谱和流式细胞术实验中，细胞经染料染色后测量荧光动力学；FRAP实验中监测细胞漂白后的恢复过程。数据通过MEM进行指数分解分析。
5：数据分析方法：
采用MEM将时间依赖性荧光信号分解为指数成分，统计分析使用Matlab中的ANOVA方法。
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ZEISS LSM 780-FCS
LSM 780-FCS
ZEISS
Used for confocal microscopy and FRAP experiments.
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PTI QuantaMaster 40
QuantaMaster 40
PTI
Used for fluorescence spectroscopy measurements, including steady-state spectra and kinetics.
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BeckmanCoulter EpicsXL
EpicsXL
BeckmanCoulter
Used for flow cytometry measurements of cell fluorescence.
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Matlab
R2015a 8.5.0.197613
MathWorks
Used for data analysis, including MEM decomposition and statistical tests.
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ImageJ
1.49 m
Used for image analysis in microscopy experiments.
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MEMfit
Software for Maximum Entropy Method decomposition of exponential components.
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