研究目的
研究三价离子（Y3?和La3?）存在下BSA蛋白在重入凝聚过程中的荧光行为，探索其结构与光学变化。
研究成果
在含三价盐的牛血清白蛋白（BSA）中会发生重入凝聚现象，导致浊相中出现最大荧光发射强度和流体力学尺寸。发射强度与相行为及扩散系数变化相关，表明聚集结构中流动性降低致使发射增强。
研究不足
该研究假设在动态光散射（DLS）解释中，溶液即使在浑浊相中也不会出现显著的多重散射现象。所提出的模型也未考虑BSA分子的实际形状、表面电荷异质性或构象修饰。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用紫外-可见光谱、荧光光谱、时间分辨荧光光谱（TRPL）和动态光散射（DLS）技术，通过分析光学响应与流体力学特性来探究BSA与三价盐的再入凝聚现象。
2：样本选择与数据来源：
在Milli-Q水中配制5、15和25 mg/ml的BSA溶液，分别加入浓度为0至20 mM的YCl3和LaCl3盐溶液。
3：15和25 mg/ml的BSA溶液，分别加入浓度为0至20 mM的YCl3和LaCl3盐溶液。 实验设备与材料清单：
3. 实验设备与材料清单：设备包括岛津UV-1800分光光度计（紫外-可见光谱）、JASCO FP-8500荧光分光光度计（发射光谱）、爱丁堡仪器荧光光谱仪（FSP920型号，290 nm LED光源用于TRPL）以及马尔文Zeta纳米系列粒度仪（nano ZS90，配备633 nm氦氖激光器和雪崩光电二极管探测器用于DLS）。材料采用Sigma-Aldrich公司的BSA（货号A2153）、YCl3（货号464317）和LaCl3（货号31820）。
4：3）、YCl3（货号464317）和LaCl3（货号31820）。 实验流程与操作规范：
4. 实验流程与操作规范：在特定波长下采集紫外-可见光谱和荧光光谱数据；TRPL测量采用290 nm激发/338 nm发射的时间域技术；DLS测量以90°检测角获取扩散系数和流体力学尺寸的自相关函数。
5：数据分析方法：
使用FAST软件通过双点分析法处理TRPL寿命数据；DLS数据采用累积量分析法获取平均衰减常数与多分散性指数；通过斯托克斯-爱因斯坦关系式由扩散系数计算流体力学半径。
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UV-Vis Spectrophotometer
UV-1800
Shimadzu
Used for taking UV-Vis absorption spectra of protein solutions.
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Fluorescence Spectrofluorometer
FP-8500
JASCO
Used for measuring emission spectra of protein solutions with excitation at 278 nm.
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Fluorometer
FSP920
Eddinburg Instrument
Used for time-resolved photoluminescence (TRPL) spectroscopy with a 290 nm LED source.
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Zeta Sizer
nano ZS90
Malvern
Used for dynamic light scattering (DLS) to measure hydrodynamic size and zeta potential of protein solutions.
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BSA Protein
A2153
Sigma-Aldrich
The globular protein studied, used in solutions of 5, 15, and 25 mg/ml concentrations.
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Yttrium Chloride
464317
Sigma-Aldrich
Trivalent salt used to induce re-entrant condensation in BSA solutions.
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Lanthanum Chloride
31820
Sigma-Aldrich
Trivalent salt used to induce re-entrant condensation in BSA solutions.
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