研究目的
设计与合成含冰片基团的BODIPY衍生物,以增强细胞膜通透性,从而提升活细胞成像应用效果。
研究成果
合成的含冰片基团的BODIPY衍生物具有高荧光量子产率和优异的细胞膜穿透性,适用于细胞和溶酶体成像?;衔?表现出特异的溶酶体靶向能力,在肿瘤诊断和生物研究中具有应用前景。
研究不足
该研究仅限于使用HeLa细胞进行体外成像,未涉及进一步的体内应用和毒性研究。部分化合物的合成产率较低,且光物理性质仅在甲苯中测定,未在水相或生物环境中测量。
1:实验设计与方法选择:
本研究通过酯化反应和Knoevenagel缩合等化学反应合成BODIPY衍生物,随后采用核磁共振(NMR)、高分辨质谱(HRMS)和X射线晶体学进行表征。使用紫外-可见光谱和荧光光谱测量光物理性质,并通过共聚焦显微镜进行细胞成像。
2:样本选择与数据来源:
以HeLa细胞作为成像研究的模式细胞系,在含胎牛血清的DMEM培养基中培养。
3:实验设备与材料清单:
所用化学品和溶剂均为市售级别,包括SOCl?、DMF、吡啶、THF、TFA、TEA、BF?·OEt?、哌啶、PTSA等特定试剂及多种溶剂。设备包括紫外-可见分光光度计、荧光光谱仪、核磁共振仪、高分辨质谱仪、共聚焦显微镜和X射线衍射仪。
4:实验步骤与操作流程:
合成过程包含多步:制备冰片基4-甲?;郊姿狨?、与吡咯反应以及缩合反应。纯化通过柱层析完成。细胞成像实验中,将HeLa细胞与化合物孵育后,用LysoTracker Green和Hoechst 33342染色,并采用特定激光激发和发射收集的共聚焦显微镜成像。
5:数据分析方法:
光物理数据通过量子产率和速率常数公式分析。荧光寿命采用时间分辨光谱测量。细胞成像数据通过共定位研究和Z轴深度扫描分析。
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Kieselgel 60 F254
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Used for staining lysosomes in co-staining experiments with the compounds.
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Hoechst 33342
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Used for nuclear staining in co-staining experiments.
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