研究目的
研究微藻以寻找可能用于肿瘤光动力治疗的新光敏剂。
研究成果
微藻成分是光动力疗法中有效的光敏剂，在光照激活下可使肿瘤细胞存活率降低高达95%。双重光照暴露显示出更高疗效，并呈现剂量依赖性反应。未来工作应聚焦于分离和鉴定活性化合物以进一步开发。
研究不足
该研究使用的是复杂的半纯化提取物，难以确定具体的活性化合物。研究是在体外进行的，因此未涉及体内适用性和临床相关性。不同条件下可能需要优化光照时间和剂量。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用三种提取方法（纤维素酶、溶菌酶、超声处理）对微藻菌株的半纯化提取物进行光动力治疗光敏特性评估。通过测量荧光和吸收光谱，并在蓝光、红光或双光照射后使用MTT法评估光毒性。
2：样本选择与数据来源：
使用七种微藻物种（小球藻属、M.C.属、栅藻属、衣藻属、微拟球藻属、四鞭藻属、布朗葡萄藻）的提取物。四种人肿瘤细胞系（A549、LNCap、MCF-7、MDA-MB 435）在含FBS的DMEM培养基中培养。
3：LNCap、MCF-MDA-MB 435）在含FBS的DMEM培养基中培养。 实验设备与材料清单：
3. 实验设备与材料清单：设备包括二极管阵列分光光度计（安捷伦8453）、荧光酶标仪（MR 700 Dynatech，Dynex）、共聚焦显微镜（尼康A1 si）、LED光源（Phantom，深圳CIDLY光电科技）、培养箱（IR自动水流夹套培养箱；JenconsNuaire）、透析膜管（纤维素膜，Fisher）。材料包括DMEM、FBS、DMSO、MTT、酶（纤维素酶、溶菌酶）及微藻提取物。
4：3）、荧光酶标仪（MR 700 Dynatech，Dynex）、共聚焦显微镜（尼康A1 si）、LED光源（Phantom，深圳CIDLY光电科技）、培养箱（IR自动水流夹套培养箱；JenconsNuaire）、透析膜管（纤维素膜，Fisher）。材料包括DMEM、FBS、DMSO、MTT、酶（纤维素酶、溶菌酶）及微藻提取物。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：细胞接种后，在黑暗环境中与提取物共孵育24小时，清洗后进行光照处理（5-10分钟），通过MTT法测定细胞活力。记录荧光和吸收光谱，使用共聚焦显微镜观察细胞内定位。
5：数据分析方法：
采用t检验分析数据（p<0.05为显著）。量化荧光强度和细胞活力，测定IC50值。
独家科研数据包，助您复现前沿成果，加速创新突破
获取完整内容-
diode array spectrophotometer
Agilent 8453
Agilent
Record absorbance spectra of samples between 220-850 nm wavelengths.
-
fluorescence plate reader spectrophotometer
MR 700 Dynatech
Dynex
Measure fluorescence emissions and quantify UV absorption for MTT assay.
-
confocal microscope
Nikon A1 si
Nikon
Image intracellular localization of fluorescent materials in cells.
-
LED light source
Phantom
Shenzhen CIDLY Optoelectronic Technology
Irradiate cells with blue and red light for photodynamic therapy.
-
incubator
IR Autoflow Water-Jacketed Incubator
JenconsNuaire
Maintain cell cultures at controlled temperature and CO2 levels.
-
dialysis membrane tube
Cellulose Membrane
Fisher
Dialyze samples to remove small molecules.
-
登录查看剩余4件设备及参数对照表
查看全部
