研究目的
开发一种灵敏、简单、快速的免标记电化学免疫传感器,用于定量检测人附睾特异性蛋白4抗原(HE4 Ag),该传感器采用基于TiO2-NGO/Au@Pd异质纳米结构的新型多重信号放大策略。
研究成果
基于TiO2-NGO/Au@Pd HSs杂化纳米结构开发的无标记电化学免疫传感器对HE4抗原检测表现出优异的灵敏度、选择性、重现性和稳定性,具有宽线性范围和低检测限,有望应用于癌症生物标志物筛查的临床检测。
研究不足
该论文未明确提及具体局限性,但潜在方面可能包括超出四周的长期稳定性、复杂样本中其他生物标志物的干扰,以及大规模生产的可扩展性。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用TiO2-NGO/Au@Pd HSs异质纳米结构作为信号放大平台,设计了一种无标记电化学免疫传感器。方法包括TiO2-NGO的水热合成、Au@Pd HSs的种子介导法制备,以及电化学测量(电流分析法、循环伏安法、电化学阻抗谱)。
2:样本选择与数据来源:
以人附睾蛋白4抗原(HE4 Ag)为分析物,通过人血清样本进行回收率研究。
3:实验设备与材料清单:
设备包括CHI760E电化学工作站、玻碳电极(GCE,直径4 mm)、铂丝辅助电极、饱和甘汞参比电极(SCE)。材料包括氧化铝粉末、TiO2-NGO/Au@Pd HSs纳米复合材料、HE4抗体、牛血清白蛋白(BSA)、磷酸盐缓冲溶液(PBS)、过氧化氢(H2O2)、铁氰化钾(K3[Fe(CN)6])、氯化钾(KCl)。
4:2)、铁氰化钾(K3[Fe(CN)6])、氯化钾(KCl)。 实验步骤与操作流程:
4. 实验步骤与操作流程:对GCE进行抛光和清洗,将TiO2-NGO/Au@Pd HSs滴涂于GCE表面,依次孵育抗HE4抗体、BSA和HE4 Ag。在含H2O2底物的PBS溶液中,以-0.4 V电位进行电化学测量。
5:4 V电位进行电化学测量。 数据分析方法:
5. 数据分析方法:采用电流-时间曲线、循环伏安法和电化学阻抗谱分析数据,使用Laviron模型计算电子转移速率常数,标准加入法进行回收率研究。
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electrochemical workstation
CHI760E
Shanghai CH Instruments Co.
Used for performing electrochemical measurements including amperometry, cyclic voltammetry, and electrochemical impedance spectroscopy.
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glassy carbon electrode
GCE
Serves as the working electrode in the electrochemical immunosensor.
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platinum wire electrode
Used as the auxiliary electrode in the electrochemical setup.
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saturated calomel electrode
SCE
Serves as the reference electrode in the electrochemical measurements.
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