研究目的
研究巨噬细胞对超小氧化铁颗粒(VSOP)和 Ferumoxytol 纳米颗粒的摄取是否能增强光学相干断层扫描(OCT)对其检测能力,以用于动脉粥样硬化斑块的成像。
研究成果
当巨噬细胞摄取VSOP和ferumoxytol纳米颗粒后,由于其在吞噬溶酶体中聚集,会显著增强光散射和光学相干断层扫描(OCT)信号。这种多模态方法可提高动脉粥样硬化斑块中巨噬细胞的检测能力,在临床环境中具有增强OCT成像的潜力。
研究不足
细胞团块的OCT图像可能因密集堆积且缺乏动脉壁等结构特征而显得噪声较多。本研究为体外实验,结果需在体内验证。所用OCT系统未经改装,未来改进或可提升检测效果。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用巨噬细胞系进行体外实验,测量纳米颗粒摄取后的光散射和光学相干断层扫描(OCT)信号。方法包括分光光度法和OCT成像来评估反向散射和衰减。
2:样本选择与数据来源:
使用RAW 264.7巨噬细胞,分别与VSOP(1和2 mM铁)和ferumoxytol(8.9 mM铁)孵育。数据从细胞沉淀物和纳米颗粒悬浮液中收集。
3:7巨噬细胞,分别与VSOP(1和2 mM铁)和ferumoxytol(9 mM铁)孵育。数据从细胞沉淀物和纳米颗粒悬浮液中收集。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:设备包括荧光分光光度计(F-7000,日立有限公司)、OCT成像系统(OPTIS?,圣犹达医疗公司)、分光光度计(Specord? 205,耶拿分析仪器股份公司)和透射电子显微镜(蔡司EM906)。材料包括VSOP、ferumoxytol、DMEM、FBS、青霉素-链霉素、PBS和PCR管。
4:实验步骤与操作流程:
培养巨噬细胞,与纳米颗粒孵育,洗涤并沉淀。使用分光光度法测量光散射,并对细胞沉淀物进行OCT成像。铁定量采用比色法进行。
5:数据分析方法:
使用GraphPad Prism 5.0进行统计分析,包括单因素方差分析(ANOVA)和Tukey多重比较检验。OCT图像使用ILUMIEN? OPTIS?离线审查工作站的Tissue Properties工具进行分析。
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fluorescence spectrophotometer
F-7000
Hitachi Ltd
Measuring light scattering of control macrophages, nanoparticle-labeled macrophages, and nanoparticle suspensions in synchronous wavelength scan mode.
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spectrophotometer
Specord? 205
Analytik Jena AG
Measuring light absorption of VSOP and ferumoxytol nanoparticles.
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transmission electron microscope
EM906
Carl Zeiss Meditec AG
Imaging VSOP accumulated in macrophages of atherosclerotic plaques for TEM analysis.
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OCT imaging system
OPTIS?
St Jude Medical, Inc.
Performing OCT imaging of cell pellets and analyzing backscatter and attenuation values.
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ferumoxytol
Feraheme?
AMAG Pharmaceuticals, Inc.
Used as a nanoparticle contrast agent for incubating macrophages and measuring uptake and light scattering effects.
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VSOP
Very small iron oxide particles used as a nanoparticle contrast agent for incubating macrophages and measuring uptake and light scattering effects.
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