研究目的
开发一种替代性抗菌疗法，采用包裹酞菁的壳聚糖-三聚磷酸钠纳米颗粒进行光动力治疗，并序贯使用氟胞嘧啶治疗，以有效根除耐药热带念珠菌且不诱导耐药性。
研究成果
先进行FNP - PDT治疗，随后使用氟胞嘧啶的序贯疗法，通过同时靶向假菌丝和酵母细胞，能有效根除耐药热带念珠菌，使其存活率降至约10%。这种方法为传统抗真菌疗法提供了一种有前景的替代方案，具有产生耐药性的风险极小，且可能适用于其他病原体。
研究不足
该研究仅限于体外实验，未评估体内疗效和安全性。FePC的摄取率仅提高至5%，表明递送效率仍有改进空间。该策略可能需要针对其他病原体和临床应用进行优化。
1：实验设计与方法选择：
本研究通过制备壳聚糖/三聚磷酸钠（TPP）纳米颗粒包封酞菁铁（FePC）以增强光动力疗法（PDT）效果，旨在提高光敏剂的溶解度和细胞摄取率。方法包括纳米颗粒制备、表征及抗菌实验。
2：样本选择与数据来源：
使用热带念珠菌（ATCC 13803）和白色念珠菌（ATCC 90029），由大林慈济医院提供。菌株培养于酵母提取物-蛋白胨-葡萄糖（YEPD）培养基。
3：实验设备与材料清单：
设备包含傅里叶变换红外光谱仪（VERTEX 70v，布鲁克）、动态光散射仪（DLS，Nano-ZS90，马尔文）、紫外-可见分光光度计（S-3100，Scinco）、酶标仪及自制LED光照装置。材料包括壳聚糖、三聚磷酸钠、铁(III)酞菁-4,4',4'',4'''-四磺酸（FePC）、氟胞嘧啶、氟康唑及MTT检测试剂。
4：实验流程与操作步骤：
通过离子交联法制备纳米颗粒，测定其粒径、zeta电位及包封效率。PDT实验包括将念珠菌与光敏剂共孵育，采用红色LED（630 nm，20 J/cm2）光照，通过菌落计数或MTT法评估细胞活力，并测试氟胞嘧啶序贯治疗效果。
5：数据分析方法：
采用t检验进行统计分析，显著性水平p<0.05、0.01或0.001。数据为三次重复实验的平均值。
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FT-IR Spectrometer
VERTEX 70v
Bruker
Used for measuring FT-IR spectra of nanoparticles to confirm composition.
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Dynamic Light Scattering Instrument
Nano-ZS90
Malvern
Used to measure hydrodynamic diameter, polydispersity index, and zeta potential of nanoparticles.
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Iron(III) Phthalocyanine-4,4',4'',4'''-tetrasulfonic Acid
FePC
Sigma-Aldrich
Used as the photosensitizer in photodynamic therapy.
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UV-VIS Spectrophotometer
S-3100
Scinco
Used to measure absorbance for determining free FePC concentration and encapsulation efficiency.
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LED Array
Homemade device with 20 red LEDs
Used for illumination in photodynamic therapy experiments.
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Chitosan
Sigma-Aldrich
Used as a material for fabricating nanoparticles to encapsulate photosensitizer.
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Sodium Tripolyphosphate
Sigma-Aldrich
Used as a cross-linking agent in nanoparticle fabrication.
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Flucytosine
Used as an antifungal agent in combination therapy.
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Fluconazole
Used as an antifungal agent for comparison in resistance tests.
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