研究目的
通过视网膜退化小鼠模型，研究玻璃体内注射人骨髓CD34?干细胞对退化视网膜的影响。
研究成果
玻璃体内注射人骨髓CD34+细胞可归巢至视网膜表面，并在退化视网膜中引发分子变化，提示其具有潜在的营养再生效应，但该模型中未观察到功能改善。需进一步研究验证。
研究不足
全身免疫抑制可能影响细胞行为和视网膜反应；EGFP标记不完全；治疗在视网膜退化晚期开始，可能减弱治疗效果；rd1模型进展迅速，可能不利于检测功能益处。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用系统性免疫抑制的鼠模型（C3H/HeJrd1/rd1小鼠）探究人骨髓CD34+细胞玻璃体内注射的效果。方法包括活体成像（SLO/OCT）、ERG检测、免疫组化和微阵列分析。
2：样本选择与数据来源：
使用32只小鼠，人骨髓穿刺液来自健康供体。小鼠经免疫抑制后分别注射CD34+细胞或PBS。
3：实验设备与材料清单：
设备包括Alzet微量渗透泵、磁性细胞分选仪（Miltenyi）、SLO/OCT成像系统、ERG系统（LKC Big Shot）、显微镜（Nikon）及微阵列工具（Affymetrix）。材料包含免疫抑制剂（他克莫司、雷帕霉素）、EGFP标记试剂、抗体及RNA提取试剂盒。
4：实验流程与操作步骤：
小鼠免疫抑制后玻璃体内注射，于1周和4周进行成像或检测，处死后取眼球分析。
5：数据分析方法：
微阵列数据采用Affymetrix软件和IPA分析；统计分析使用ANOVA；免疫组化和成像数据定性分析。
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获取完整内容-
Photomultiplier tube
H7422-40
Hamamatsu Photonics, K.K.
Used to detect EGFP emitted fluorescence light in the SLO imaging system.
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Photomultiplier tube
H7422-20
Hamamatsu Photonics, K.K.
Used to acquire reflected light signal in the SLO imaging system.
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CMOS camera
Sprint spL4096-140km
Basler Electronics
Used as the OCT detector in the spectrometer for retinal imaging.
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Leica microtome
RM2125RT
Leica
Used to cut sections of retinal tissue for immunohistochemistry.
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Agilent BioAnalyzer
RNA Nano 6000
Agilent Technologies
Used to assess the quality and quantity of RNA samples.
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Alzet micro-osmotic pump
1004
Durect Corporation
Used for systemic immunosuppression by releasing tacrolimus and rapamycin at a constant rate.
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Miltenyi human CD34 MicroBead Kit
Cat#130-046-702
Miltenyi Biotec, Inc.
Used to magnetically sort CD34t cells from the mononuclear cell fraction of human bone marrow aspirate.
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LKC Big Shot
UTAS Visual Electrodiagnostic System with EM for Windows Version 1.3
LKC Technologies, Inc.
Used for electroretinography (ERG) testing to measure retinal function.
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Super-continuum laser
SC-400
Fianium, Inc.
Used as the light source for the scanning laser ophthalmoscopy (SLO) subsystem in retinal imaging.
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Broadband light source
Broadlighter 890
Superlum Diodes Ltd.
Used for the optical coherence tomography (OCT) subsystem in retinal imaging.
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Mouse contact lens
0-diopter (D)
Unicon Corporation
Used to keep the mouse cornea hydrated during retinal imaging.
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Nikon Eclipse E800 microscope
E800
Nikon
Used for viewing and digitizing images in immunohistochemistry.
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Qiagen miRNeasy isolation kit
miRNeasy
Qiagen
Used to isolate total RNA from retinal tissue for microarray analysis.
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Affymetrix GeneChip microarray
Mouse Transcriptome Assay 1.0 (MTA1)
Affymetrix
Used for microarray analysis to study gene expression changes in the retina.
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