研究目的
开发一种用于活细胞中亚硒酸钠定量成像的比率荧光探针，以评估其动态变化和生理效应，特别是在癌症研究中的应用。
研究成果
HBTN-Se是一种对亚硒酸钠具有高灵敏度和高选择性的比率型荧光探针，可在活细胞中实现定量成像。该探针成功区分了正常细胞与癌细胞中的亚硒酸钠水平，并与抗癌效应相关联，在推动硒化合物应用于癌症治疗方面展现出良好前景。
研究不足
该探针的性能仅限于生理pH范围（6-9），可能无法覆盖所有生物条件。特异性测试针对常见干扰物，但未涵盖所有可能的生物分子。本研究聚焦于体外细胞培养，体内应用尚未充分探索。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用基于ESIPT的荧光团（HBTN）连接乙酰丙?；聂腔；び胪驯；げ呗?，构建了对亚硒酸钠选择性响应的探针（HBTN-Se），实现比率荧光成像。
2：样本选择与数据来源：
HepG2（癌细胞）和L-02（正常细胞）在含FBS、青霉素和链霉素的DMEM培养基中培养。亚硒酸钠及其他分析物制备为储备液。
3：实验仪器与材料清单：
仪器包括布鲁克Ascend 400M和700M核磁共振仪、布鲁克Apex IV飞行时间质谱仪、北京普析TU-1901紫外可见分光光度计、日立F-7000荧光分光光度计、奥林巴斯倒置荧光显微镜及赛默飞世尔Multiskan FC酶标仪。材料包括HBTN-Se、Na2SeO3、各类分析物、乙醇、PBS缓冲液、DMEM、FBS、青霉素、链霉素、MTT、DMSO及合成试剂。
4：各类分析物、乙醇、PBS缓冲液、DMEM、FBS、青霉素、链霉素、MTT、DMSO及合成试剂。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：通过HBTN与乙酰丙酸反应合成HBTN-Se。光学研究将分析物加入HBTN-Se溶液，5分钟后测定光谱。细胞成像用Na2SeO3和HBTN-Se处理后进行荧光显微镜观察。细胞毒性采用MTT法评估。
5：数据分析方法：
计算荧光比值（I475nm/I410nm）实现定量检测。统计分析基于三组实验的均值±标准差。核磁共振与质谱用于机制验证。
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