研究目的
开发一种制备具有生物偶联反应位点的荧光微球的新方法，使用共轭聚合物与微球共价键合，并评估其在基于流式细胞术应用中的有效性。
研究成果
该研究成功开发了一种简便方法，用于制备具有反应位点的荧光微球——通过将共轭聚合物与APGMA微球共价键合。流式细胞术检测显示这些微球具有良好的稳定性和有效的生物偶联能力（表现为高双阳性百分比）。该方法在高通量应用（如悬浮阵列）中展现出良好前景。
研究不足
该研究仅限于特定的共轭聚合物和微球类型；未涉及大规模生产的可扩展性和成本问题。该方法可能需要针对其他生物分子或应用进行优化。
1：实验设计与方法选择：
通过Sonogashira偶联和水解反应合成了两种含羧基的共轭聚合物（CP1和CP2），随后利用EDC/NHS活化通过共价键将其固定于氨基修饰的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯（APGMA）微球上，最后进行表征并与FITC标记的BSA生物偶联。
2：样本选择与数据来源：
以直径5微米的APGMA微球为基底。共轭聚合物为实验室自制。BSA-FITC通过FITC标记BSA制备获得。
3：实验仪器与材料清单：
仪器包括核磁共振仪、凝胶渗透色谱仪、傅里叶变换红外光谱仪、紫外-可见分光光度计、荧光分光光度计、扫描电镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、热重分析仪及振荡器。材料包含四氢呋喃、二氧六环、EDC、NHS、FITC、BSA及各类缓冲液。
4：实验流程与操作步骤：
共轭聚合物合成、EDC/NHS活化、固定于APGMA微球、洗涤步骤、BSA-FITC制备、生物偶联反应及带补偿的流式细胞术检测。
5：数据分析方法：
采用流式细胞术进行荧光检测与补偿分析（超10,000个微球样本），结合光谱与显微技术进行表征，并开展统计学分析。
独家科研数据包，助您复现前沿成果，加速创新突破
获取完整内容-
FTIR spectrophotometer
Nicolet 6700
Thermo
Obtaining FTIR spectra for structural analysis.
-
UV-vis spectrophotometer
Hitachi U-3900/3900H
Hitachi
Collecting UV-vis absorption spectra.
-
SEM
Hitachi S-4700
Hitachi
Obtaining scanning electron microscopic images.
-
LSCM
Leica TCS SP5 II
Leica
Obtaining confocal fluorescent images.
-
TGA
Perkin-Elmer Pyris1
Perkin-Elmer
Conducting thermogravimetric analysis.
-
NMR spectrometer
Inova 400 MHz
Recording 1H NMR spectra for polymer characterization.
-
GPC
HLC-8320
Measuring molecular weights of polymers.
-
Spectrofluorometer
Horiba FluoroMax-4
Horiba
Measuring photoluminescence emission spectra.
-
Flow cytometer
BD FACSVerse
BD
Obtaining flow cytometry data for fluorescence detection and compensation.
-
Oscillator
IKA MS3 digital
IKA
Performing oscillation processes for mixing and washing.
-
登录查看剩余8件设备及参数对照表
查看全部
