研究目的
开发在生理条件下高度稳定的亲水性C60纳米颗粒，用于光动力疗法及其他生物应用，且无需对C60进行化学修饰。
研究成果
C60/磺基琥珀胆碱纳米颗粒因强主客体相互作用和负表面电荷，在生理条件下具有高度稳定性，从而延长血液循环、减少网状内皮系统摄取并有效从器官中清除。它们在体内外均表现出优异的光动力活性，通过产生活性氧实现显著抗肿瘤效果。该方法能精确评估C60的生物活性，并拓展其在纳米医学中的应用。
研究不足
该研究未充分探究纳米颗粒的长期毒性或代谢途径。由于与血浆蛋白重叠，在血浆等复杂生物环境中测量聚集行为具有挑战性。肿瘤中的光穿透可能不均匀，从而影响光动力疗法的疗效。
1：实验设计与方法选择：
通过自动磁力搅拌研钵将C60与磺基丁醚β-环糊精或γ-环糊精共同研磨制备C60纳米颗粒，随后经超声分散于水或PBS中。采用动态光散射技术测定粒径和zeta电位进行表征，在不同盐溶液中研究聚集行为。荷瘤小鼠静脉给药后开展生物分布研究，通过HPLC从器官和血液中提取C60。体外光动力活性采用ESR光谱法和细胞活力检测评估，体内则通过光照后监测肿瘤生长进行评价。
2：样本选择与数据来源：
C60和C70购自Frontier Carbon公司；磺基丁醚β-环糊精来自MSD株式会社；γ-环糊精购自日本食品化工公司。肿瘤模型使用植入ddY小鼠的S-180肉瘤细胞。
3：实验设备与材料清单：
自动磁力搅拌研钵（MNV-01，AS ONE）、动态光散射仪（DLS-8000HL，大冢电子）、zeta电位分析仪（ELS-Z，大冢电子）、HPLC系统（日立）、氙灯光源（MAX-303，旭光谱）、ESR谱仪及NaCl、KCl、CaCl2、MgCl2、PBS等化学试剂。
4：MgClPBS等化学试剂。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：4℃减压条件下将C60与环糊精共研磨3小时，超声分散后测定粒径及zeta电位，添加盐溶液研究聚集现象，小鼠尾静脉注射，器官提取物进行HPLC分析，光动力治疗实施光照，采用t检验进行统计分析。
5：数据分析方法：
采用学生t检验分析数据显著性（p<0.05为显著），药代动力学参数根据血浆浓度数据计算。
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xenon light source
MAX-303
Asahi Spectra
Provides light irradiation for photodynamic therapy experiments.
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automatic magnetic agitating mortar
MNV-01
AS ONE
Used for grinding C60 with cyclodextrins to prepare nanoparticles.
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dynamic light scattering instrument
DLS-8000HL
Otsuka Electronics
Measures particle size of nanoparticles.
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zeta potential analyzer
ELS-Z
Otsuka Electronics
Measures zeta potential of nanoparticles.
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HPLC system
Hitachi
Used for quantitative analysis of C60 in samples.
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ESR spectrometer
Used to evaluate reactive oxygen species generation.
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C60
nanom purple SUH
Frontier Carbon
Raw material for nanoparticle preparation.
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C70
nanom orange
Frontier Carbon
Used as internal standard in HPLC analysis.
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sugammadex
Bridion
MSD
Cyclodextrin derivative used to stabilize C60 nanoparticles.
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γ-cyclodextrin
Nihon Shokuhin Kako
Reference material for comparison in nanoparticle preparation.
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