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基于荧光厄洛替尼示踪剂的EGFR突变实时分子光学显微成像

DOI：10.1186/s12890-018-0760-z 期刊：BMC Pulmonary Medicine 出版年份：2019 更新时间：2025-09-23 13:45:19
摘要： 背景：通过肿瘤DNA测序常规检测肺腺癌中的EGFR突变。本研究旨在评估一种荧光标记的厄洛替尼治疗诊断试剂，利用小鼠异种移植模型和光纤共聚焦荧光显微镜（FCFM），在体外和离体条件下对突变型EGFR肿瘤进行分子成像。方法：本实验室通过将荧光素添加到厄洛替尼分子上合成了该荧光示踪剂。将三种EGFR突变型人腺癌细胞系（HCC827、H1975和H1650）和一种EGFR野生型细胞系（A549）异种移植到35只裸鼠体内。暴露于示踪剂后进行MTT细胞活力测定。体外成像使用1μM示踪剂溶液，离体成像则对从小鼠身上新鲜切取的肿瘤进行1μM示踪剂PBS溶液1小时孵育。采用FCFM进行实时分子成像，并记录每次实验的中位荧光强度（MFI）。结果：MTT细胞活力测定证实，在厄洛替尼中添加荧光素不会抑制其对肿瘤细胞的细胞毒性。体外FCFM成像显示，该示踪剂能区分EGFR突变型与野生型细胞系（p<0.001）。EGFR突变型异种移植瘤的离体FCFM成像MFI显著高于野生型（p<0.001）。以354任意单位为临界值时，该示踪剂的MFI对识别EGFR突变型肿瘤的灵敏度为100%，特异度为96.3%。结论：使用荧光标记厄洛替尼的实时分子成像技术能够识别离体EGFR突变型肿瘤。
作者： Maxime Patout，Florian Guisier，Xavier Brune，Pierre Bohn，Anthony Romieu，Nasrin Sarafan-Vasseur，Richard Sesboüé，Pierre-Yves Renard，Luc Thiberville，Mathieu Salaün
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研究概述 实验方案 设备清单

研究目的

评估一种基于荧光标记厄洛替尼的治疗诊断试剂，通过小鼠异种移植模型和纤维共聚焦荧光显微镜（FCFM），在体外和离体条件下对突变EGFR肿瘤进行分子成像。

研究成果

基于荧光厄洛替尼的示踪剂可通过FCFM实时高灵敏度、高特异性地识别EGFR突变肿瘤，但临床应用还需开展人体样本的进一步研究。

研究不足

该研究未采用标准共聚焦显微镜确认示踪剂的细胞内定位，未评估荧光素添加的功能性后果，且无法在离体状态下区分敏感与耐药的EGFR突变。研究未在人体样本上进行测试，因此截断值和背景噪声可能存在差异。

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