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基于分裂适配体的荧光共振能量转移腺苷脱氨酶检测传感平台

DOI：10.1016/j.talanta.2019.01.041 期刊：Talanta 出版年份：2019 更新时间：2025-09-24 03:48:23
摘要： 本文构建了一种基于分裂适配体的荧光共振能量转移（FRET）平台，通过金纳米簇（AuNCs）和金纳米颗粒（AuNPs）测定腺苷脱氨酶（ADA）活性。将单个三磷酸腺苷（ATP）适配体拆分为两个片段（分别称为P1和P2）。P1的5′端共价连接AuNCs（P1-AuNCs），P2的3′端标记AuNPs（P2-AuNPs）。在ATP存在时，ATP与两个片段高亲和力结合，使P1-AuNCs与P2-AuNPs连接，从而通过P1-AuNCs向P2-AuNPs的FRET淬灭P1-AuNCs的荧光。加入ADA后，ATP转化为肌苷三磷酸（ITP），P1和P2释放导致体系荧光恢复。因此可通过体系荧光强度变化建立基于分裂适配体的ADA检测FRET平台。该平台在2-120 U L-1范围内荧光强度与ADA浓度呈良好线性关系，检测限（LOD）为0.72 U L-1。此外，人血清样本中ATP的检测证明了该方法对实际样本中ADA检测的准确性和适用性。
作者： Mengke Wang，Junyang Chen，Dandan Su，Guannan Wang，Xingguang Su
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研究概述 实验方案 设备清单

研究目的

构建基于分裂适配体的荧光共振能量转移（FRET）平台用于测定腺苷脱氨酶（ADA）活性。

研究成果

基于分裂适配体的FRET平台成功实现了对腺苷脱氨酶（ADA）的高灵敏度（检测限0.72 U L-1）和高选择性检测，在人血清样本中展现出适用性。该技术为现有方法提供了一种简便、无标记的替代方案，具有临床诊断应用潜力。

研究不足

该方法在血清之外的复杂生物基质中可能存在局限性，且特异性测试仅针对有限的酶类；可能需要更多干扰物的进一步验证。条件的优化（如反应时间、浓度）是针对本实验设置进行的，未经调整可能无法推广适用。

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