研究目的
开发一种新型开启式荧光探针,用于环境生物样品分析中高特异性、超高灵敏度识别多硫化氢(H2Sn)。
研究成果
探针1是一种高效的H2Sn荧光开启型传感器,具有高灵敏度、高选择性、大斯托克斯位移和低背景的特点。它成功实现了活细胞和斑马鱼中H2Sn的成像,显示出在生物应用中的潜力。未来工作可探索其在更复杂生物体和实际样品中的应用。
研究不足
探针的性能可能受pH值影响,在强酸性条件(pH 2-4)下荧光增强效果减弱。该研究仅限于体外和简单的体内模型(细胞和斑马鱼),在更复杂的生物系统中可能需要进一步验证。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用双重猝灭策略(ESIPT抑制猝灭和PET猝灭)设计探针1用于检测H2Sn。合成了荧光染料2并进行了表征,通过连接识别基团制备了探针1。开展了光谱研究、选择性测试、动力学研究、pH效应评估、细胞成像及斑马鱼成像实验。
2:样本选择与数据来源:
样本包括探针1和染料2溶液、多种分析物(如Na2S2、Na2S等)、A549细胞及斑马鱼胚胎。数据通过紫外-可见光谱、荧光光谱、质谱、核磁共振及共聚焦显微镜获取。
3:Na2S等)、A549细胞及斑马鱼胚胎。数据通过紫外-可见光谱、荧光光谱、质谱、核磁共振及共聚焦显微镜获取。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:设备包含岛津UV-2450分光光度计、岛津RF5301PC荧光分光光度计、Waters Xevo G2-S QTof质谱仪、BRUKER 400核磁共振仪、蔡司LSM710显微镜、PHS-3C pH计。材料包括市售试剂、薄层色谱板、硅胶及合成化合物。
4:实验流程与操作步骤:
染料2和探针1的合成涉及特定化学反应。光谱研究通过将探针储备液与分析物在PBS缓冲液中混合进行。细胞实验包括用探针和H2Sn孵育A549细胞。斑马鱼成像实验涉及用H2Sn和探针处理胚胎。
5:数据分析方法:
测量并分析荧光强度以确定线性关系、检测限和选择性。统计分析包括计算检测限的信噪比。
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