研究目的
开发一种高灵敏度、高选择性的次氯酸根（OCl?）荧光探针，并将其应用于活细胞生物成像。
研究成果
探针1是一种高选择性和高灵敏度的次氯酸根检测荧光探针，其检测限低至0.11微摩尔，响应迅速。该探针适用于肉眼检测和活细胞生物成像，在生物体系中展现出实际应用价值。未来工作可着重提升对亚硫酸氢根的选择性，并拓展至活体研究应用。
研究不足
探针因亲核加成作用显示出HSO3?的轻微干扰，其响应时间虽快（不足3分钟），但对所有应用场景可能并非即时响应。该研究在特定溶液条件（CH3CH2OH/PBS，pH 7.4）下进行，这可能限制其在其他环境中的适用性。
1：实验设计与方法选择：
本研究设计并合成了一种新型吲哚鎓类荧光探针（探针1），通过双氧化反应机制检测次氯酸盐。采用荧光和紫外-可见光谱法评估其在CH3CH2OH/PBS溶液中的选择性、灵敏度及响应时间。
2：样本选择与数据来源：
合成的探针1与多种分析物（包括阴离子和活性氧物种）进行测试。生物成像使用中国科学院细胞库的Eca109细胞。
3：实验设备与材料清单：
设备包括布鲁克DTX-400核磁共振波谱仪、日立F-7000荧光分光光度计、安捷伦Cary 100紫外-可见分光光度计、赛默飞HPLC Q-Exactive高分辨质谱仪及蔡司Axio Observer D1倒置荧光显微镜。材料包括次氯酸钠、其他阴离子及CH3CH2OH、DMSO-d6等溶剂。
4：实验流程与操作步骤：
探针1在氮气氛围下通过CH3CH2OH反应合成并纯化。光谱测量在CH3CH2OH/PBS溶液中进行。细胞成像将Eca109细胞与探针1和NaClO共孵育后显微镜观察。
5：数据分析方法：
监测荧光强度变化，采用3σ/斜率法计算检测限，并通过高分辨质谱谱图验证反应机制。
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spectrometer
DTX-400
Bruker
Used for measuring 1H and 13C NMR spectra of samples dissolved in DMSO-d6 with TMS as internal reference.
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spectrophotometer
F-7000
Hitachi
Used for fluorescence measurements in the study.
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spectrometer
Cary 100
Agilent
Used for recording UV-vis spectra.
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HR-MS spectrometer
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Used for measuring ESI mass spectra with MeOH as mobile phase.
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Axio Observer D1
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Used for Eca109 cells imaging experiments under fluorescence microscopy.
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