研究目的
设计和合成一种荧光探针，用于快速且高度选择性识别硫化氢（H2S），其性能优于现有探针。
研究成果
探针H - DNP能有效、灵敏且具有选择性地检测硫化氢，响应迅速、检测限低，适用于活细胞，显示出在生物和环境监测方面的潜力。
研究不足
该探针要求缓冲溶液中含有DMSO，这可能会影响生物应用。选择性较高但非绝对，观察到来自Cys、Hcy和GSH等生物硫醇的轻微干扰。响应在较宽pH范围内与pH相关，但在生理pH附近达到最佳。
1：实验设计与方法选择：
本研究设计了一种基于四氢[5]螺烯衍生物（含2,4-二硝基苯磺酸酯基团）的荧光探针用于H2S检测，其机制依赖于H2S诱导的硫解反应实现荧光开启。研究方法包括合成、紫外-可见及荧光光谱分析、核磁共振表征、密度泛函理论计算和细胞成像。
2：样本选择与数据来源：
合成了探针H-DNP并进行表征。检测对象包括H2S（以NaHS形式）、多种离子、氨基酸及生物硫醇。溶液配制采用PBS缓冲液与DMSO混合体系，使用HeLa细胞进行细胞毒性与成像研究。
3：实验设备与材料清单：
设备包含布鲁克AV-500核磁共振仪、珀金埃尔默Lambda 950紫外-可见分光光度计、LS-55荧光分光光度计、Delta 320 pH计、蔡司LSM 710共聚焦显微镜；材料包括硅胶及Heowns、Energy Chemical、Adamas-beta等供应商提供的各类化学试剂与标准品。
4：实验流程与操作步骤：
H-DNP合成经多步反应及纯化处理，在PBS/DMSO溶液中进行光谱测定，开展H2S及其他分析物的滴定实验，实施细胞培养、探针与NaHS孵育及共聚焦成像。
5：数据分析方法：
测量并分析荧光强度，以硫酸奎宁为标准计算量子产率，采用IUPAC方法确定检测限，通过核磁共振与密度泛函理论计算验证反应机制。
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