研究目的
为了评估多电荷酞菁作为选择性配体对G-四链体DNA结构(而非双链DNA)的潜在作用,旨在癌症治疗中抑制端粒酶。
研究成果
ZnPc1和ZnPc4对G-四链体DNA表现出比对双链DNA更高的选择性和亲和力,在癌症治疗中具有抑制端粒酶的潜力。电荷数量与位置的平衡对选择性至关重要。这两种化合物在癌细胞核内积聚并显示出细胞毒性,表明其作为治疗药物具有前景。
研究不足
该研究仅限于体外实验;未探索体内疗效及详细的结合机制。选择性和亲和力主要通过特定DNA序列进行评估,若要更广泛应用可能还需进一步优化。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用紫外-可见光谱(UV-Vis)、荧光光谱(G4-FID检测法)及圆二色谱(CD)探究酞菁类化合物与不同DNA结构(G-四链体与双链DNA)的相互作用。通过滴定实验评估亲和力与选择性。
2:样本选择与数据来源:
DNA寡核苷酸包括人端粒重复序列(AG3(T2AG3)3)、双分子四膜虫重复序列(G4T4G4)2、四分子序列(T2G5T)4及双链DNA(5GC和鲑鱼精DNA)。酞菁化合物(ZnPc1-ZnPc4)与TMPyP为合成或市售品。
3:3)、双分子四膜虫重复序列(G4T4G4)四分子序列(T2G5T)4及双链DNA(5GC和鲑鱼精DNA)。酞菁化合物(ZnPc1-ZnPc4)与TMPyP为合成或市售品。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:设备包含岛津UV-2501-PC分光光度计、堀场Fluoromax-3荧光光谱仪、日本分光J-1500/J-815圆二色谱仪、卡尔蔡司共聚焦显微镜LSM 710。材料含PBS缓冲液、DMSO、赛默飞世尔科技寡核苷酸及西格玛奥德里奇TMPyP。
4:实验流程与操作步骤:
滴定实验通过向酞菁溶液添加DNA监测光谱变化;荧光检测采用噻唑橙置换法;CD熔解实验测定稳定效应;细胞研究包含UM-UC-3膀胱癌细胞的MTT实验与荧光显微镜观察。
5:数据分析方法:
使用Hypspec程序计算KD值,荧光滴定采用Hill饱和结合模型,CD熔解曲线进行S型拟合,MTT实验采用非线性回归分析。
独家科研数据包,助您复现前沿成果,加速创新突破
获取完整内容-
UV-2501-PC spectrophotometer
UV-2501-PC
Shimadzu
Recording UV-Vis absorption spectra in the range 350-800 nm for studying ligand-DNA interactions.
暂无现货
预约到货通知
-
J-1500 CD spectrophotometer
J-1500
Jasco
Acquiring circular dichroism spectra for DNA structure analysis and melting experiments.
暂无现货
预约到货通知
-
J-815 CD spectrophotometer
J-815
Jasco
Acquiring circular dichroism spectra with temperature control for stability studies.
暂无现货
预约到货通知
-
confocal microscope
LSM 710
Carl Zeiss
Imaging fluorescence in cells to assess nuclear uptake of ligands.
ZEISS LSM 990 Spectral Multiplex
立即获取同款设备 -
oligonucleotides
Various sequences (e.g., AG3(T2AG3)3, G4T4G4)2)
Thermo Fisher Scientific
DNA samples for forming G-Quadruplex and duplex structures in experiments.
暂无现货
预约到货通知
-
Fluoromax-3 spectrofluorometer
Fluoromax-3
Horiba
Measuring fluorescence emissions for G4-FID assays and intrinsic fluorescence titrations.
暂无现货
预约到货通知
-
TMPyP
5,10,15,20-Tetrakis(1-methylpyridinium-4-yl)porphyrin tosylate
Sigma Aldrich
Used as a standard ligand for comparison in DNA binding studies.
暂无现货
预约到货通知
-
登录查看剩余5件设备及参数对照表
查看全部