研究目的
开发用于可视化细胞中脂滴与溶酶体相互作用的荧光生物探针，实现对脂滴运动和消耗等动态过程的高特异性、高灵敏度监测。
研究成果
开发的TPA-BTTDO纳米颗粒作为有效的荧光生物探针，可用于可视化脂滴-溶酶体相互作用，展现出高光稳定性、生物相容性及极性敏感的双发射特性。它们能实时监测脂滴运动与消耗等动态过程，在代谢相关疾病研究中具有应用潜力。未来工作应聚焦于体内验证及更广泛的生物学场景。
研究不足
该研究仅限于体外细胞培养（HeLa、NIH 3T3、ktr-3细胞），可能无法完全反映体内情况。未深入探究探针在不同细胞类型或各种生理条件下的特异性和作用机制。潜在的优化方案包括在动物模型中进行测试或采用更多细胞器标记物以提高适用性。
1：实验设计与方法选择：
本研究设计并合成了一种具有聚集诱导发光（AIE）和扭曲分子内电荷转移（TICT）特性的新型荧光分子TPA-BTTDO。通过纳米沉淀法将TPA-BTTDO包封于DSPE-PEG2000基质中制备纳米颗粒（NPs），以增强其水分散性和生物相容性，用于生物成像应用。
2：样本选择与数据来源：
使用HeLa细胞、NIH 3T3细胞和ktr-3细胞作为生物样本。采用Lysotracker DND 99、BODIPY和Mitotracker等商用探针进行共定位研究。
3：BODIPY和Mitotracker等商用探针进行共定位研究。 实验设备与材料清单：
3. 实验设备与材料清单：仪器包括Bruker AV 500核磁共振波谱仪、GCT premier CAB048高分辨质谱仪、Shimadzu UV-2600紫外-可见分光光度计、Horiba Fluoromax-4荧光光谱仪、Hamamatsu C11347 Quantaurus_QY量子产率仪、Zeiss LSM 710共聚焦显微镜、Malvern ZSE动态光散射仪、Qsonica超声仪、Invitrogen Countess II细胞计数仪、JEOL JEM-1400 Plus透射电镜和Thermo Fisher酶标仪。材料包括TPA-BTTDO、DSPE-PEG2000、溶剂（THF等）、细胞培养试剂（DMEM、FBS）和抑制剂（如dynasore）。
4：溶剂（THF等）、细胞培养试剂（DMEM、FBS）和抑制剂（如dynasore）。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：通过钯催化偶联反应合成TPA-BTTDO；将TPA-BTTDO与DSPE-PEG2000溶于THF，超声下加水，氮气除THF后透析制备NPs。采用MTT法检测细胞活力。将NPs与细胞孵育，商用探针共染色后通过共聚焦激光扫描显微镜成像。进行内化动力学、内吞抑制实验（低温和抑制剂处理）及时间依赖性成像。采用λ扫描分析发射光谱。
5：数据分析方法：
通过重叠系数和皮尔逊相关系数量化共定位。对细胞活力和光稳定性进行统计分析。分析发射光谱偏移和量子产率。
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GCT
Recorded high resolution mass spectra (HRMS) in MALDI-TOF mode for molecular characterization.
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