研究目的
开发一种高特异性和高选择性的荧光放大策略，用于细胞内葡萄糖检测，该系统涉及银纳米立方体、葡萄糖氧化酶和银离子荧光探针。
研究成果
已开发出一种高灵敏度、高特异性的细胞内葡萄糖检测荧光放大策略，该策略利用葡萄糖催化产生的H2O2氧化银纳米立方体，并通过Ag+离子实现后续荧光增强。该方法在细胞葡萄糖监测应用中展现出良好前景，且可推广至其他酶-底物体系。
研究不足
细胞内H2O2的干扰会影响检测准确性，而由于浓度波动，细胞内葡萄糖的定量具有挑战性。该探针在长期使用中的稳定性和潜在毒性尚未得到充分解决。
1：实验设计与方法选择：
本研究采用信号放大策略，通过葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化产生H2O2，进而将银纳米立方体氧化为Ag+离子。这些Ag+离子随后增强特定探针（Ag+-FP）的荧光信号。方法学包括AgNC-GOx偶联物和Ag+-FP的合成，随后进行体外及细胞水平的葡萄糖检测实验。
2：样本选择与数据来源：
使用不同葡萄糖浓度的水溶液及五种细胞系（MCF-10a、HeLa、MCF-7、A375、4T1）。细胞培养于含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的DMEM培养基中。
3：0a、HeLa、MCF-A4T1）。细胞培养于含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的DMEM培养基中。 实验设备与材料清单：
3. 实验设备与材料清单：材料包括乙二醇、三氟乙酸银、硫辛酸、葡萄糖氧化酶、聚乙烯吡咯烷酮、罗丹明B、多种糖类、H2O2检测试剂盒等（供应商：JK化学、Sigma-Aldrich、MCE）。设备包括Synergy H1多功能酶标仪、Thermo Scientific Lumina荧光分光光度计、Cary 60紫外-可见分光光度计、JEM-1230透射电镜、Malven Zetasizer 2000、傅里叶变换红外光谱仪、IVIS Spectrum成像系统。
4：傅里叶变换红外光谱仪、IVIS Spectrum成像系统。 实验流程与操作步骤：
4. 实验流程与操作步骤：AgNC-GOx合成通过硫辛酸与AgNC的Ag-S键连接，再经NHS和EDC与GOx偶联。Ag+-FP由罗丹明B合成。葡萄糖检测时，将AgNC-GOx与葡萄糖溶液或细胞孵育后加入Ag+-FP并测定荧光强度。
5：数据分析方法：
测量荧光强度并与葡萄糖浓度关联。统计分析包括均值±标准差及细胞实验的Student's t检验。
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