研究目的
设计和合成一种新型的"开启型"荧光探针，用于在活细胞中高灵敏度、高选择性地检测硫化氢（H2S）。
研究成果
DPD探针是一种对H2S具有高选择性、高灵敏度、快速响应和低检测限的高效"开启型"荧光探针。它成功实现了活细胞内H2S的监测，推动了新型H2S检测荧光探针的发展。
研究不足
硫化钠（Na2S）的响应时间比硫氢化钠（NaHS）更长，且该探针在碱性条件（pH 11-12）下工作效果不佳。其作用机制涉及还原反应，可能不可逆。
1：实验设计与方法选择：
本研究基于苝醌设计合成了荧光探针DPD，通过紫外-可见和荧光光谱评估其检测能力，并利用1H NMR确认作用机制。开展细胞成像实验以评估其在活细胞中的适用性。
2：样本选择与数据来源：
采用HeLa细胞进行共聚焦成像。测试选择性所用的分析物包括多种阴离子、阳离子、胺类和氨基酸，储备液均用蒸馏水或DMSO配制。
3：实验仪器与材料清单：
仪器包含布鲁克（500 MHz）核磁共振仪、珀金埃尔默LS-55光谱仪、珀金埃尔默Lambda 950分光光度计、Delta 320 pH计、徕卡TCS SPE共聚焦扫描显微镜及蔡司LSM 710共聚焦显微镜；材料包括商业采购的DPD、NaHS等分析物。
4：实验流程与操作步骤：
DPD储备液用DMSO配制，向DPD溶液中加入分析物，2分钟后记录光谱。细胞实验将HeLa细胞与DPD和NaHS共孵育后进行共聚焦成像。
5：数据分析方法：
通过荧光和吸收光谱分析选择性、灵敏度、响应时间及pH依赖性，检出限按LOD=3×δblank/k公式计算。
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NMR instrument
500 MHz
Bruker
Recording 1H and 13C NMR spectra to confirm the chemical structure and mechanism of the probe DPD and its reaction with H2S.
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Fluorescence spectrometer
LS-55
PerkinElmer
Collecting fluorescence spectra to evaluate the fluorescence response of DPD to H2S and other analytes.
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UV-vis spectrophotometer
Lambda 950
PerkinElmer
Recording UV-vis absorption spectra to monitor color changes and absorption bands of DPD upon addition of H2S.
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Confocal scanning microscope
TCS SPE
Leica
Acquiring confocal fluorescence images of living cells to demonstrate the probe's ability to monitor H2S in biological systems.
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Confocal microscope
LSM 710
ZEISS
Performing confocal fluorescence imaging of HeLa cells to visualize H2S detection in living cells.
ZEISS LSM 990 Spectral Multiplex
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pH-meter
Delta 320
Mettler-Toledo
Determining pH values of solutions to study pH dependence of the probe's response.
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Ultrapure water equipment
TS-DI-10L/h
Dow Lab
Producing ultrapure water for preparing solutions used in spectroscopic and cell experiments.
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