研究目的
开发一种简便的原位生长方法,将MOF纳米粒子整合到无机纳米材料中,并设计一个荧光开关以触发增强的光动力治疗。
研究成果
该研究成功开发出具有可切换荧光和光动力活性的核壳结构MOF@MnO2杂化材料。通过谷胱甘肽响应性激活,该材料能消耗细胞内谷胱甘肽并实现MRI引导,从而增强光动力治疗效果。该方法为多功能MOF-无机复合物提供了合理设计方案,在小鼠模型中展现出更优的肿瘤根除效果和生存率,且无明显毒性。
研究不足
该研究在现场生长方法的可扩展性方面可能存在局限性,难以实现大规模生产。未充分探究谷胱甘肽响应性激活在不同生物环境中的特异性和效率?;旌夏擅卓帕T谔迥诘那痹诔て诙拘曰蛎庖叻从ι形吹玫浇饩?。二氧化锰与谷胱甘肽的最佳治疗平衡可能因具体情况而异,需要进一步优化。
1:实验设计与方法选择:
本研究采用原位生长法将金属有机框架(MOF)纳米颗粒整合到无机纳米材料(MnO?)中。通过合成ZIF-8和ZrMOF纳米颗粒,随后在其表面生长MnO?纳米点或纳米片,形成核-卫星或核-壳结构。利用MnO?的荧光淬灭效应和谷胱甘肽(GSH)还原作用调控荧光与光动力活性。体外实验包括荧光光谱、单线态氧生成检测、细胞毒性测试及MRI弛豫率测定;体内实验使用U87MG荷瘤小鼠评估光动力疗效及MRI引导治疗效果。
2:样本选择与数据来源:
样本包含合成的ZIF-8、ZrMOF、ZIF-FITC@MnO?和ZrMOF@MnO?纳米颗粒。数据源自实验室合成与表征(如透射电镜TEM、高角环形暗场扫描透射电镜HAADF-STEM、X射线光电子能谱XPS、动态光散射DLS、紫外-可见光谱UV-vis、荧光光谱、液质联用LC-MS、电感耦合等离子体质谱ICP)。体内数据来自U87MG肿瘤小鼠模型。
3:ZrMOF、ZIF-FITC@MnO?和ZrMOF@MnO?纳米颗粒。数据源自实验室合成与表征(如透射电镜TEM、高角环形暗场扫描透射电镜HAADF-STEM、X射线光电子能谱XPS、动态光散射DLS、紫外-可见光谱UV-vis、荧光光谱、液质联用LC-MS、电感耦合等离子体质谱ICP)。体内数据来自U87MG肿瘤小鼠模型。 实验设备与材料清单:
3. 实验设备与材料清单:设备:透射电镜(TEM)、高角环形暗场扫描透射电镜(HAADF-STEM)、X射线光电子能谱(XPS)、动态光散射(DLS)、紫外-可见分光光度计、荧光光谱仪、液质联用系统(LC-MS)、电感耦合等离子体仪器(ICP)、MRI系统、共聚焦显微镜(蔡司LSM 780)、酶标仪。材料:硝酸锌(Zn(NO?)?)、2-甲基咪唑、氯氧化锆(ZrOCl?)、四(4-羧基苯基)卟啉(TCPP)、苯甲酸、高锰酸钾(KMnO?)、谷胱甘肽(GSH)、单线态氧传感器绿(SOSG)、噻唑蓝(MTT)、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)、钙黄绿素AM/碘化丙啶(PI)、聚乙二醇(PEG)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、甲醇、水、乙酸钠、磷酸盐缓冲液(PBS)。
4:0)、酶标仪。材料:
4. 实验流程与操作步骤:ZIF-8和ZrMOF纳米颗粒在甲醇或DMF中按特定反应条件合成;MnO?原位生长通过向纳米颗粒溶液搅拌加入水相KMnO?实现。分别在有无GSH处理条件下测量荧光强度与单线态氧生成量。细胞毒性通过激光照射后的MTT比色法及活/死染色评估。体内实验包括尾静脉注射PEG化纳米颗粒,继而进行激光照射与MRI成像。
5:实验流程与操作步骤:
5. 数据分析方法:数据分析包含荧光强度测定、SOSG定量单线态氧、MTT吸光度计算细胞存活率、流式细胞术分析凋亡、ICP检测Mn释放量、MRI弛豫率(r?)计算及肿瘤生长/生存率的统计学分析。
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Confocal Microscope
LSM 780
Zeiss
Used for fluorescence imaging of cells, such as U87MG cells with MOF nanoparticles.
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Transmission Electron Microscopy
Used for imaging nanoparticle structures, such as ZIF-8, ZIF-FITC@MnO2, and ZrMOF@MnO2.
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High-Angle Annular Dark-Field Scanning Transmission Electron Microscopy
Used for high-resolution imaging and element mapping of ZrMOF@MnO2 nanoparticles.
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X-ray Photoelectron Spectroscopy
Used for surface chemical analysis of ZrMOF@MnO2 nanoparticles.
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Dynamic Light Scattering
Used to measure particle size distribution and colloidal stability of ZrMOF and ZrMOF@MnO2.
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UV-vis Spectrophotometer
Used to measure absorbance spectra of ZrMOF, ZrMOF@MnO2, and GSH-treated samples.
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Fluorescence Spectrometer
Used to measure fluorescence intensity of ZIF-FITC, ZrMOF, and their hybrids with MnO2 and GSH.
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LC-MS System
Used for liquid chromatography-mass spectrometry to analyze GSH and GSSG formation.
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ICP Instrument
Used for inductively coupled plasma analysis to measure Mn release from ZrMOF@MnO2.
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MRI System
Used for magnetic resonance imaging to measure T1 relaxivity and in vivo imaging in mice.
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Plate Reader
Used to measure absorbance in MTT assays for cell viability.
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Laser
Used for irradiation in photodynamic therapy experiments, e.g., 650 nm laser for singlet oxygen generation and cell treatment.
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