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585纳米发光二极管通过旁分泌效应上调受照角质形成细胞中H19/miR-675轴来抑制黑色素生成
摘要: 585纳米发光二极管已被证实可抑制黑素细胞中的黑素生成。然而,该波长LED是否会影响正常人表皮角质形成细胞(NHEKs)及其照射后对黑素生成的旁分泌效应尚不明确。目的:阐明585纳米LED通过NHEKs及其外泌体的旁分泌作用抑制黑素生成的体外可能机制。方法:采用CCK8法检测不同能量密度585纳米LED照射的NHEKs细胞活性,将照射后的NHEKs培养基与黑素细胞共培养,检测黑色素含量、酪氨酸酶活性及黑素生成相关酶活性。通过电镜和纳米颗粒追踪分析分离鉴定NHEKs培养基中的外泌体,分析H19及其编码的外泌体miR-675表达变化。结果:0-20 J/cm2能量密度的585纳米LED照射对NHEKs无细胞毒性。与照射后的NHEKs培养基共培养后,黑色素含量和酪氨酸酶活性降低,小眼畸形相关转录因子(MITF)、酪氨酸酶(TYR)及酪氨酸酶相关蛋白1(TRP-1)在mRNA和蛋白水平的黑素生成活性均下调。已证实与黑素生成相关的NHEKs来源H19及其衍生外泌体miR-675在照射后显著上调。此外,敲低NHEKs中H19或抑制miR-675可减弱585纳米LED对黑素生成的抑制作用。结论:本研究证明585纳米LED可通过上调NHEKs中H19及其衍生外泌体miR-675来抑制黑素生成,该机制被视为调控黑素生成的新型旁分泌因子。
关键词: 外泌体、H19/miR-675、黑色素生成、发光二极管(LED)、角质形成细胞
更新于2025-09-19 17:13:59
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利用金纳米棒结合酶辅助靶标循环扩增技术实现ATP的超灵敏无标记检测
摘要: 三磷酸腺苷(ATP)的异常浓度与多种疾病直接相关。因此,对ATP进行灵敏检测对疾病早期诊断至关重要。本研究采用带正电荷的金纳米棒((+)AuNPs)作为高效荧光猝灭平台,结合外切酶I(Exo I)辅助的目标物循环扩增技术,建立了一种超灵敏的ATP检测策略。通过构建含有ATP适配体的DNA模板形成银纳米簇信号探针(DNA/AgNCs),该结构在与ATP作用后可转变为双链结构。此类DNA模板或双链DNA产物可通过静电吸附于(+)AuNRs表面,由于银纳米簇与(+)AuNRs的邻近效应导致荧光信号猝灭。加入Exo I后,DNA双链被水解并从(+)AuNRs表面释放,使荧光信号恢复,同时ATP得以再生进入下一轮目标物循环。结合(+)AuNRs优异的荧光猝灭能力和Exo I介导的信号放大效应,实现了26 pM的ATP检测低限。值得注意的是,该方法成功应用于血清样本中ATP的检测,显示出在癌症早期诊断中的潜在应用价值。
关键词: 外泌体(cid:1)、荧光传感器、(+)金纳米棒、DNA/银纳米簇、ATP检测、靶标循环扩增
更新于2025-09-16 10:30:52
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通过表面增强拉曼光谱实现外泌体的无标记表征以早期检测胰腺癌
摘要: 胰腺癌是一种高度致命的恶性肿瘤。缺乏早期诊断标志物使得及时发现胰腺癌极具挑战性。外泌体作为富含信息的癌症特异性生物标志物已崭露头角,但肿瘤特异性外泌体的特征分析一直困难重重。本研究验证了利用外泌体检测胰腺癌的原理可行性——通过表面增强拉曼光谱(SERS)和主成分差异函数分析(PC-DFA),对正常与胰腺癌细胞系纯化的外泌体进行无标记分析,以识别肿瘤特异性光谱特征。该方法能以90%的准确率区分源自胰腺癌或正常胰腺上皮细胞系的外泌体。随后将细胞系训练的PC-DFA算法应用于血清纯化外泌体的SERS光谱分析,该方案对健康对照(HC)和胰腺上皮内瘤变(EPC)个体样本分别显示出高达87%和90%的预测准确率。总体而言,本研究证实了SERS光谱特征在解析外泌体表面特征中的实用价值。
关键词: 表面增强拉曼光谱、液体活检、胰腺癌、外泌体、无标记
更新于2025-09-04 15:30:14