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一种用于检测碱性磷酸酶和细胞成像的聚集诱导发光荧光探针
摘要: 碱性磷酸酶(ALP)与多种疾病相关,其精准检测具有重要意义。具有聚集诱导发光(AIE)特性的荧光化合物作为荧光探针具有显著优势。本研究通过在分子中部引入强吸电子基团(氰基)、末端修饰识别基团磷酸基团,合成了具有较高共轭程度和良好水溶性的D-A-D结构AIE活性"开启型"ALP检测探针。研究发现该TPE-CN-pho探针对水溶液中的ALP具有高度敏感性:当ALP存在时,探针上的亲水性磷酸基团被快速水解去除,导致水溶性降低并形成聚集体,从而实现聚集诱导发光。此外,该探针TPE-CN-pho已成功应用于活细胞内ALP的成像检测。
关键词: 碱性磷酸酶、聚集诱导发光、荧光探针、细胞成像、生物传感器
更新于2025-09-10 09:29:36
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碱性磷酸酶触发近红外纳米粒子自组装用于增强肿瘤光声成像
摘要: 光声(PA)成像因具有高空间分辨率,在浅表癌症诊断中具有优势。但据我们所知,目前尚未见利用碱性磷酸酶(ALP)激活型探针增强肿瘤PA成像的报道。本研究合理设计了一种近红外探针IR775-Phe-Phe-Tyr(H2PO3)-OH(1P),用于体外及肿瘤内ALP活性的PA成像。在ALP催化下,1P高效转化为IR775-Phe-Phe-Tyr-OH(1)并自组装成纳米颗粒1-NPs。1-NPs的形成使1P在795 nm处的PA信号增强了6.4倍。体内肿瘤PA成像结果显示:与ALP抑制剂处理的对照组相比,实验组小鼠在注射1P后4小时的PA对比度提升了2.3倍。通过将1P中的Phe-Phe-Tyr(H2PO3)-OH基序替换为其他酶切底物,我们有望在未来开发更多针对相应癌症的精准诊断PA探针。
关键词: 光声成像、近红外纳米颗粒、碱性磷酸酶、自组装
更新于2025-09-09 09:28:46
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基于铜纳米团簇荧光聚集诱导猝灭的碱性磷酸酶活性测定
摘要: 本文描述了一种以L-组氨酸为稳定剂、抗坏血酸(AA)为还原剂快速合成铜纳米簇(CuNCs)的方法。该铜纳米簇在390/485 nm激发/发射波长下呈现蓝绿色荧光。研究建立了一种灵敏的荧光分析法用于检测碱性磷酸酶(ALP)活性:当ALP底物对硝基苯磷酸盐(PNPP)被酶解生成对硝基酚(PNP)时,由于PNP在410 nm的吸收带与CuNCs在390 nm的激发峰重叠,会引发CuNCs荧光猝灭;此外,CuNCs表面的氨基和咪唑基团可能与PNP的酚羟基形成复合物,导致聚集诱导荧光淬灭。该荧光探针的线性分析范围为0.5-40 mU·mL?1,检测限为45 μU·mL?1。
关键词: 碱性磷酸酶、聚集诱导猝灭、荧光法、内滤效应、L-组氨酸、铜纳米簇
更新于2025-09-04 15:30:14
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基于数字图像比色法与智能手机集成的纸质微型化免疫传感器,用于肉眼可见的碱性磷酸酶检测
摘要: 碱性磷酸酶(ALP)是天然存在于生乳中的金属蛋白,被视为牛奶质量控制的重要生物标志物。实现其简便、个性化且无需仪器的检测,对确保牛奶经过巴氏杀菌并与生乳区分至关重要。基于ALP的这种重要性,我们开发了一种办公打孔机制作的纸质生物传感器,用于牛奶样本中ALP的肉眼检测。通过结合智能手机的数字图像比色法(DIC)技术进行定量分析。该传感器探针是通过将ALP抗体(抗-ALP)共价固定在功能化纸表面制备而成。采用DIC、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和原子力显微镜(AFM)对生物传感探针的制备进行了表征。检测基于传感器探针与ALP之间的免疫复合物形成,利用ALP对5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(BCIP)的催化活性产生蓝绿色沉淀作为分析信号。通过智能手机摄像头捕捉蓝绿色复合物的剂量依赖性显色,并采用红绿蓝(RGB)分析系统的数字图像比色法进行分析,其中红色通道灵敏度最高。根据DIC分析,ALP检测的动态范围为10-1000 U/mL,检测限为0.87(±0.07)U/mL。所设计的纸质生物传感器成功应用于商业奶和生乳样本中ALP的检测。评估了牛奶样本中成分引起的干扰,并测试了所设计生物传感器的长期稳定性。基于检测原理,开发了一种微型化试剂盒[20.0毫米(长)×20.0毫米(宽)×2.15毫米(高)],用于ALP检测以展示其无需仪器、直接适用于厨房的特点。
关键词: 微型化原型、碱性磷酸酶、纸基生物传感器、数字图像比色法、生物分析
更新于2025-09-04 15:30:14