金(III)结合牛血清白蛋白不同构象中的发光团形成

摘要： 所提方案的目的是研究Au(III)与BSA的结合过程，该过程会引发BSA-Au(III)复合物因构象变化而产生红色荧光（发射波长λem=640 nm）。通过调节pH值证实，红色荧光的产生与BSA构象的pH诱导平衡转变相关。仅在pH≥9.7（对应BSA的"A型"构象）条件下才能形成红色荧光BSA-Au(III)复合物。方案详细描述了调节BSA与Au摩尔比及监测Au(III)结合过程时序的方法，产生红色荧光所需每个BSA结合的Au(III)最小数量少于七个。我们分步骤阐述该方案以展示BSA中存在多个Au(III)结合位点：首先通过先添加铜(Cu(II))或镍(Ni(II))阳离子再引入Au(III)，揭示了一个非红色荧光团的Au(III)结合位点；其次采用硫醇封端剂修饰BSA后，发现另一个不形成荧光团的Au(III)结合位点；第三通过切断和封闭二硫键改变BSA构象，展示了可能的Au(III)结合位点。该控制BSA构象与Au(III)结合的方案可普遍应用于研究其他蛋白质与金属阳离子的相互作用。