基于数字图像比色法与智能手机集成的纸质微型化免疫传感器，用于肉眼可见的碱性磷酸酶检测

摘要： 碱性磷酸酶（ALP）是天然存在于生乳中的金属蛋白，被视为牛奶质量控制的重要生物标志物。实现其简便、个性化且无需仪器的检测，对确保牛奶经过巴氏杀菌并与生乳区分至关重要?；贏LP的这种重要性，我们开发了一种办公打孔机制作的纸质生物传感器，用于牛奶样本中ALP的肉眼检测。通过结合智能手机的数字图像比色法（DIC）技术进行定量分析。该传感器探针是通过将ALP抗体（抗-ALP）共价固定在功能化纸表面制备而成。采用DIC、傅里叶变换红外光谱（FTIR）和原子力显微镜（AFM）对生物传感探针的制备进行了表征。检测基于传感器探针与ALP之间的免疫复合物形成，利用ALP对5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐（BCIP）的催化活性产生蓝绿色沉淀作为分析信号。通过智能手机摄像头捕捉蓝绿色复合物的剂量依赖性显色，并采用红绿蓝（RGB）分析系统的数字图像比色法进行分析，其中红色通道灵敏度最高。根据DIC分析，ALP检测的动态范围为10-1000 U/mL，检测限为0.87（±0.07）U/mL。所设计的纸质生物传感器成功应用于商业奶和生乳样本中ALP的检测。评估了牛奶样本中成分引起的干扰，并测试了所设计生物传感器的长期稳定性?；诩觳庠恚⒘艘恢治⑿突约梁衃20.0毫米（长）×20.0毫米（宽）×2.15毫米（高）]，用于ALP检测以展示其无需仪器、直接适用于厨房的特点。