细胞接触界面蛋白质-蛋白质相互作用的荧光涨落光谱检测法

摘要： 多种生物过程涉及细胞间相互作用，这类作用通常由相邻细胞界面处的互作蛋白介导。值得注意的是，目前仅有少数检测方法能直接在活细胞中特异性探测此类相互作用。本研究建立了一种测定相邻细胞表面蛋白在细胞接触位点结合能力的方法：首先将目标蛋白分别与不同荧光蛋白融合并共转染细胞，随后通过共聚焦激光扫描显微镜对细胞接触区域的荧光波动进行光谱分析。我们以淀粉样前体蛋白类似物1（APLP1）跨细胞连接区的相互作用为例，验证了该检测方法在生物学相关体系中的可行性。文中详细阐述了基于荧光技术（扫描荧光交叉相关光谱、交叉相关数量与亮度分析）的数据采集方案及仪器校准流程，并讨论了数据分析的关键环节，包括如何识别和校正光漂白或细胞移动等外部干扰导致的异常信号波动。