基于等离子体纳米颗粒的免疫等离子体检测技术实现癌症的灵敏快速诊断：迈向细针穿刺细胞学检测

摘要： 细针穿刺细胞学是一种微创诊断策略。然而，采集的标本需经过一系列复杂的制备步骤，这限制了其作为细胞病理学家诊断手段的应用。本研究提出一种易于适配常规方法的细胞学方案，采用具有明确光学特性的等离子体生物标记物（金红散射、银/金蓝散射及银/金绿散射纳米颗粒）。当与悬浮细胞共孵育时，这些等离子体纳米颗粒在暗场侧向RGB（红-绿-蓝）照明显微镜下可清晰呈现于细胞膜表面且易于区分。通过将特异性抗体（抗人表皮生长因子受体2：HER2）偶联至等离子体纳米颗粒后，相较于传统暗场观察方案，该方案能利用侧向照明直接可视化共培养及单培养体系中悬浮细胞（MDA-MB-453++HER2和Jurkat-HER2）的选择性识别抗原。我们还采用抗CD44和抗HER2功能化等离子体纳米颗粒孵育两种癌细胞系（胰酶消化处理的MDA-MB-231++CD44和MDA-MB-453++HER2），纳米免疫等离子体检测与免疫荧光检测对表达抗原（CD44和HER2）的识别结果高度一致。结果表明，通过纳米免疫等离子体方法结合侧向照明显微镜，等离子体纳米颗粒在快速简便检测采集标本中少量细胞群方面展现出显著潜力。