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通过荧光寿命指标和色氨酸与NAD(P)H的FRET相互作用分析单细胞氧化还原状态
摘要: 经多柔比星处理的活体HeLa宫颈癌细胞氧化还原变化可通过新型荧光寿命显微镜(FLIM)氧化还原比值NAD(P)H-a2%/FAD-a1%(称为荧光寿命氧化还原比值)或其组分(NAD(P)H-a2%)进行分析——该组分实际驱动该比值并提供了更简便的替代指标,两者均进行了比较。通过双光子激发获取自体荧光NAD(P)H和FAD寿命,三光子激发获取色氨酸寿命,在处理后4个时间点(最长至60分钟)显示多柔比星的早期药物反应。每个间隔的相同视场(FoV)允许单细胞分析,显示出主要基于其初始对照氧化还原状态的治疗异质性反应?;诶肷OI选择方法区分线粒体OXPHOS和胞质糖酵解。此外,推测的携带色氨酸残基的酶与NAD(P)H之间的FRET相互作用和能量转移与NAD(P)H-a2%相关,NADPH/NADH比值亦然,凸显了追踪活体标本代谢变化的多参数检测方法。
关键词: 荧光寿命成像显微镜(FLIM)、单细胞分析、NADPH/NADH比值、NAD(P)H、氧化还原、FAD、荧光寿命氧化还原比值(FLIRR)、NAD(P)H-a2%
更新于2025-11-21 11:24:58
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一种高亲和力铜(II)离子荧光探针及其在荧光寿命相关光谱中的应用
摘要: 铜是许多生物体中最重要的过渡金属之一,它能催化多种不同的生理过程。由于铜的氧化还原活性,生物体必须避免游离铜离子的存在,而铜稳态失调可能导致细胞内多种病理过程,对受影响的生物体造成极其严重的后果。然而,在许多神经退行性疾病中,铜离子的确切作用仍未完全明确。本研究基于天然四肽DAHK合成了一种高亲和力、高选择性的铜离子探针分子。该传感器(log KD = -12.8±0.1)标记了荧光BODIPY染料,其荧光寿命在与铜(II)阳离子结合时从5.8纳秒±0.2纳秒显著缩短至0.4纳秒±0.1纳秒。通过荧光寿命相关光谱技术证实,即使在纳摩尔浓度水平下,也能同时测定探针分子及其铜结合复合物的浓度。这项工作为未来体内研究中新型铜离子探针及方法的开发提供了可能起点,有助于进一步揭示铜离子在生物体中的确切作用。
关键词: BODIPY(氟硼二吡咯)、单分子检测、荧光寿命成像显微镜(FLIM)、阿尔茨海默病、ATCUN基序、帕金森病、DAHK(天冬氨酸-丙氨酸-组氨酸-赖氨酸)
更新于2025-11-21 11:24:58
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通过荧光寿命成像测量揭示单层和多层WSe?中激子动力学的层依赖特征
摘要: 二维(2D)过渡金属硫族化合物(TMD)材料因其卓越的电子和光学特性引起了显著关注。然而,关于其复杂激子特性及预期会影响光电器件性能的激子动力学过程,目前知之甚少。荧光过程能很好地揭示激发后激子跃迁的过程。本研究首次通过荧光寿命成像显微镜(FLIM)探究了室温下层状WSe?中层依赖的激子动力学特性。本文重点研究两种主要激子类型:直接跃迁中性激子和三激子。与中性激子寿命(四层内<0.3纳秒)相比,三激子具有更长寿命(四层内约6.6纳秒),且随层数增加而延长。我们将较长寿命归因于较厚WSe?中三激子数量增加及其构型多样性。此外,当WSe?薄片从单层增至四层时,整体平均寿命增幅超过10%。本研究提供了一种新颖的可调控层依赖方法来控制激子动力学过程,并发现了室温下三激子相对较长的跃迁寿命,为未来研究基于TMD的光电器件中的电荷传输奠定了基础。
关键词: 二维(2D)二硒化钨(WSe2)、荧光寿命、荧光寿命成像显微镜(FLIM)、激子动力学、密度泛函理论(DFT)
更新于2025-09-23 15:19:57