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基于分裂适配体的荧光共振能量转移腺苷脱氨酶检测传感平台
摘要: 本文构建了一种基于分裂适配体的荧光共振能量转移(FRET)平台,通过金纳米簇(AuNCs)和金纳米颗粒(AuNPs)测定腺苷脱氨酶(ADA)活性。将单个三磷酸腺苷(ATP)适配体拆分为两个片段(分别称为P1和P2)。P1的5′端共价连接AuNCs(P1-AuNCs),P2的3′端标记AuNPs(P2-AuNPs)。在ATP存在时,ATP与两个片段高亲和力结合,使P1-AuNCs与P2-AuNPs连接,从而通过P1-AuNCs向P2-AuNPs的FRET淬灭P1-AuNCs的荧光。加入ADA后,ATP转化为肌苷三磷酸(ITP),P1和P2释放导致体系荧光恢复。因此可通过体系荧光强度变化建立基于分裂适配体的ADA检测FRET平台。该平台在2-120 U L-1范围内荧光强度与ADA浓度呈良好线性关系,检测限(LOD)为0.72 U L-1。此外,人血清样本中ATP的检测证明了该方法对实际样本中ADA检测的准确性和适用性。
关键词: 分裂适配体、金纳米簇、腺苷脱氨酶、荧光、金纳米粒子
更新于2025-09-24 03:48:23
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荧光标记牛血清白蛋白金纳米簇对人单核细胞来源的未成熟树突状细胞的细胞毒性与胞内摄取研究
摘要: 树突状细胞(DCs)是最有效的抗原呈递细胞(APCs)之一,能够激活初始T和B淋巴细胞以启动适应性免疫应答。纳米球、乳液或管状结构的工程化技术,是开发新型免疫调节剂的关键,这些制剂可有效调控或向靶部位递送免疫活性成分。牛血清白蛋白包被的金纳米簇(BSA-AuNCs)因其生物相容性、超小尺寸、大斯托克斯位移及光致发光特性,成为最具前景的蛋白质基纳米簇之一。近期研究表明,BSA稳定的AuNCs可作为药物载体及生物成像/标记的示踪剂?;谄渫怀龅纳锓植继匦?、靶向结合能力、高清除率、低毒性及良好生物适用性,BSA-AuNCs能实现体外/体内靶向特异性细胞递送,适用于治疗应用。本研究证实了稳定且高荧光的BSA-AuNCs在未成熟树突状细胞中具有较低细胞毒性,并能高效实现体外标记。通过建立有效方案,我们成功使人单核细胞来源的未成熟树突状细胞内化红色荧光BSA-AuNCs(毒性较低)。结果表明,BSA包被AuNCs的高摄取效率与其微小尺寸及配体性质密切相关。
关键词: BSA-AuNCs(牛血清白蛋白-金纳米簇)、细胞毒性、未成熟树突状细胞
更新于2025-09-10 09:29:36
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金纳米团簇的金属增强荧光作为多组分检测的传感平台
摘要: 近几十年来,金属增强荧光(MEF)因其优异的光学特性被广泛应用于构建生物传感系统。本研究通过构建由银核、二氧化硅壳层及外层共轭金纳米簇(AuNCs)组成的核壳复合纳米结构Ag@SiO2-AuNCs,利用银纳米颗粒(AgNPs)增强金纳米簇的荧光性能。该具有MEF效应的核壳纳米颗粒兼具水分散性、高稳定性和良好生物相容性。外层二氧化硅壳表面的AuNCs与银核间的相互作用显著提升了激发效率,从而增强了AuNCs的荧光发射强度、光稳定性及量子产率。当隔离距离(二氧化硅壳层厚度)约为10 nm时,复合纳米粒子Ag@SiO2-AuNCs可实现高达3.21倍的荧光增强效果?;诟媒峁沟腗EF效应及荧光信号的OFF-ON-OFF开关特性,进一步开发了多组分检测传感平台,对Cu2+、无机焦磷酸盐(PPi)和焦磷酸酶(PPase)的检测限分别为39 nM、78.7 nM和0.976 mU。该平台已成功应用于活细胞中Cu2+、PPi和PPase的检测并取得满意结果。
关键词: 金属增强荧光(MEF)、荧光传感器、核壳复合纳米结构、金纳米簇(AuNCs)
更新于2025-09-10 09:29:36
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链霉亲和素偶联金纳米簇作为超灵敏荧光传感器用于HIV感染早期诊断
摘要: 我们设计合成了链霉亲和素标记的荧光金纳米簇,开发出一种用于早期灵敏检测HIV感染的金纳米簇免疫分析法(GNCIA)。通过计算机模拟研究了纳米簇与链霉亲和素蛋白的相互作用机制,结果表明与其他金属纳米簇相比,金纳米簇能增强Au原子与特定活性位点残基的相互作用,从而提升与蛋白的结合能力。我们还评估了谷胱甘肽偶联对金纳米簇与链霉亲和素结合的影响。作为概念验证,GNCIA对临床样本中HIV-1 p24抗原的检测灵敏度下限达5 pg/ml,线性剂量依赖性检测范围最高至1000 pg/ml。与酶联免疫吸附试验相比,GNCIA检测HIV p24抗原的灵敏度和特异性均提高三倍。当使用HIV-1 p24抗原阴性但含乙肝病毒、丙肝病毒和登革热病毒等阳性血浆样本测试时,该免疫分析法的特异性达100%。未来通过采用相应的捕获抗体和检测抗体,GNCIA可发展成为一种通用标记技术,用于多种病原体抗原的特异性检测。
关键词: HIV感染、免疫测定、金纳米簇、早期诊断、荧光传感器
更新于2025-09-10 09:29:36
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用于胰蛋白酶即时检测的谷胱甘肽稳定金纳米簇敏感荧光传感器
摘要: 生物标志物的现场检测需求迫切,尤其在临床诊断与治疗应用中。本研究设计了一种便捷灵敏的荧光纳米传感器,用于胰蛋白酶(TRY)的即时检测。金纳米簇(AuNCs)的荧光强度可通过细胞色素c(Cyt c)的电子转移机制发生猝灭。胰蛋白酶能特异性催化水解Cyt c产生小肽片段,从而引发显著的荧光恢复?;诖耍肁uNCs体系对TRY表现出0.2-100 μg mL-1范围内的高灵敏选择性响应,检测限低至0.08 μg mL-1。值得注意的是,该传感方法可制备试纸条实现TRY的快速可视化识别。结合智能手机与ImageJ软件,我们进一步开发了图像处理算法用于TRY的定量检测,展现出良好前景,验证了其作为即时检测工具的应用潜力。
关键词: 金纳米簇、荧光、电子转移、胰蛋白酶、试纸条
更新于2025-09-10 09:29:36
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荧光新糖蛋白金纳米簇:合成及其在植物凝集素传感与细胞成像中的应用
摘要: 碳水化合物-蛋白质相互作用介导着受精、细胞信号传导或宿主-病原体通讯等基本生物过程。然而,由于聚糖识别事件的极端复杂性,近年来才涌现出能够分析这些过程或实现其应用的新工具。本文首次制备了功能化荧光金纳米簇的新型糖蛋白——以双天线型N-糖链G0为靶向分子,卵清蛋白为载体/模型抗原,荧光金核为成像探针(G0-OVA-AuNCs)。随后我们证实,所制备的G0-OVA-AuNCs能特异性传感植物凝集素,并可用于树突状细胞的体外成像。
关键词: 金纳米簇、树突状细胞、靶向作用、新糖蛋白、凝集素传感、碳水化合物-蛋白质相互作用
更新于2025-09-10 09:29:36
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嵌入鹅毛的发光金纳米团簇合成,用于简易制备具有聚集诱导发光特性的金(I)配合物
摘要: 一种基于超小纳米材料(即金纳米团簇AuNCs和天然珍贵馈赠——鹅毛)的新型发光杂化材料已成功合成。鹅毛因其层级结构具有高比表面积,且主要成分为富含巯基的蛋白质(如角蛋白),可大规?;乖瑼u(III)并包裹所生成的金纳米团簇。所得金色羽毛在紫外光下呈现明亮红色荧光,其亚结构(羽枝与羽小枝)均被红色发射型AuNCs充分浸染。此外,经AuNCs染色的羽毛几乎保持了原有的固体层级结构及完整化学组成。此类AuNC/羽毛杂化材料的大体积、高比表面积特性,启发我们开发出通过AuNCs刻蚀制备多种有价值碎屑(即具有聚集诱导发光特性的Au(I)配合物)的简便方法。我们分别选用三(2-羧乙基)膦和半胱胺作为刻蚀剂——已有研究报道这两种试剂能通过刻蚀可溶性蛋白?;さ慕鹉擅淄糯乩春铣删哂蠥IE特性的Au(I)配合物。该方法操作便捷,仅需徒手即可从溶液中获取无蛋白的Au(I)配合物。加入阳离子聚集诱导剂(如Cd2+)后,原本无荧光的溶液产生明亮发光,证实了合成珍贵AIE型Au(I)配合物的可行性。本研究不仅通过合理利用天然产物推动了发光金材料的发展,丰富了金纳米材料库,更明确为将纳米团簇作为试剂制备其他贵金属材料提供了新思路。
关键词: 聚集诱导发光、金纳米簇、化学蚀刻、金(I)配合物、鹅毛
更新于2025-09-10 09:29:36
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一种基于金纳米簇的简单快速荧光法检测黄酮类化合物
摘要: 由于中草药活性成分具有重要的健康益处,开发简单、易操作且能实时检测这些成分的方法引起了越来越多的关注。本研究基于黄酮类化合物与牛血清白蛋白(BSA)的特异性相互作用,建立了一种黄酮类化合物的定性与定量检测方法。将荧光金纳米簇嵌入BSA三级结构所包围的空腔中,其荧光可被黄酮类化合物快速猝灭(<5秒)。以BSA-AuNCs荧光强度降低作为输出信号,实现了黄酮类化合物的实时可视化检测。我们证实该方法能检测血清和血浆中的槲皮素,并监测中成药芦丁片中黄酮类成分的含量。BSA-AuNCs是首个用于特异性测定中草药活性成分的荧光探针。因此,这种蛋白-AuNCs传感平台可作为药物分析中便捷的检测策略。
关键词: 传感器、荧光探针、金纳米簇、黄酮类化合物
更新于2025-09-04 15:30:14